[发明专利]一种两性离子修饰树状大分子包裹金纳米颗粒/HIF-1α siRNA复合物的制备

权利要求书

1.一种聚酰胺-胺树状大分子复合物，其特征在于，所述复合物为1,3-PS修饰的聚酰胺-胺树状大分子包裹金纳米颗粒负载HIF-1αsiRNA。

2.一种聚酰胺-胺树状大分子复合物的制备方法，包括：

(1)将G5.NH₂水溶液与1,3-PS混合，搅拌，得到G5.NH₂-PS₂₀溶液，其中，G5.NH₂与1,3-PS摩尔比为1:15～1:25；

(2)将HAuCl₄溶液滴加到步骤(1)中G5.NH₂-PS₂₀溶液中，搅拌，加入NaBH₄溶液，继续反应，透析、冷冻干燥，得到{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-PS₂₀}，其中，G5.NH₂与HAuCl₄溶液中所含Au的摩尔比为1:20～1:30，NaBH₄与HAuCl₄的摩尔比为3:1～5:1；

(3)将步骤(2)中{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-PS₂₀}溶于PBS缓冲溶液中，然后与HIF-1αsiRNA溶液共孵育，得到{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-PS₂₀}/si-HIF-1α，即聚酰胺-胺树状大分子复合物，其中，{(Au⁰)₂₅-G5.NH₂-PS₂₀}与HIF-1αsiRNA的N/P为0.25:1～60:1。

3.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述步骤(1)中搅拌温度为30±2℃，搅拌时间为1-2天。

4.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述步骤(2)中将HAuCl₄溶液滴加到步骤(1)中G5.NH₂-PS₂₀溶液中是在冰浴条件下进行。

5.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述步骤(2)中搅拌时间为13-20min；继续反应时间为2-4h。

6.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述步骤(2)中透析为：采用截留分子量为500的透析袋，在2L蒸馏水中透析3天，每天换水3次。

7.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述步骤(3)中HIF-1αsiRNA的序列为5’-ATGACATGAAAGCACAGAT-3’；HIF-1αsiRNA溶液的溶剂为DEPC水。

8.根据权利要求2所述方法，其特征在于，所述步骤(3)中共孵育时间为15～30min。

9.一种如权利要求1所述复合物用于基因转染的方法。

10.一种如权利要求1所述复合物在制备基因治疗和放疗的联合治疗药物或放疗增敏药物中的应用。