[发明专利]一种基于RU61_00441基因的德尔卑沙门氏菌恒温检测试剂盒及方法在审
| 申请号： | 202010414399.3 | 申请日： | 2020-05-15 |
| 公开（公告）号： | CN111621578A | 公开（公告）日： | 2020-09-04 |
| 发明（设计）人： | 翟立公;陈泽华;王俊颖;杨剑婷;张献领;李凡怡;张会;张猛 | 申请（专利权）人： | 安徽科技学院 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/6844;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 合肥汇融专利代理有限公司 34141 | 代理人： | 张雁 |
| 地址： | 233100 安徽省蚌*** | 国省代码： | 安徽;34 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 一种 基于 ru61_00441 基因 德尔卑 沙门氏菌 恒温 检测 试剂盒 方法 | ||
1.一种用于检测德尔卑沙门氏菌的RPA引物对，其特征在于，其引起序列如下：针对RU61_00441基因，
上游引物SEQ ID NO.1：5’-GACCAGTTCTTCTTCATGACCTACGAAATC-3’
下游引物SEQ ID NO.2：5’-TTAATCCACACCTTTGGCGGAATTAGCTTA-3’。
2.一种用于检测德尔卑沙门氏菌的RPA引物于检测德尔卑沙门氏菌上的应用，其特征在于，利用RPA引物检测德尔卑沙门氏菌的方法包括以下步骤：
(1)提取样品DNA，RPA扩增；(2)凝胶电泳检测扩增产物；(3)比较电泳后条带，如果在200bp位置有条带，则证明样品中含有德尔卑沙门氏菌。
3.权利要求2所述的用于检测德尔卑沙门氏菌的RPA引物于检测德尔卑沙门氏菌上的应用，其特征在于，利用RPA引物检测德尔卑沙门氏菌的方法包括以下步骤：
(1)提取待测样品DNA；
(2)根据如权利要求1所述的序列组合成RPA特异性引物，进行RPA扩增反应；
(3)采用琼脂糖凝胶电泳，在紫外灯下判定扩增结果，比较电泳后条带，如果在200bp位置有条带，则证明样品中含有德尔卑沙门氏菌。
4.权利要求3所述的用于检测德尔卑沙门氏菌的RPA引物于检测德尔卑沙门氏菌上的应用，其特征在于：
其中使用的RPA扩增反应检测体系，50ul包含有：1×反应缓冲液44ul，10uM引物对各2ul，模板取2ul。
5.权利要求4用于检测德尔卑沙门氏菌的RPA引物于检测德尔卑沙门氏菌上的应用，其特征在于，RPA扩增反应程序参数为：37℃，反应时间25-30min，采用琼脂糖凝胶电泳。
6.一种利用检测德尔卑沙门氏菌的RPA引物检测德尔卑沙门氏菌的试剂盒，其特征在于：包含如权利要求1所述的RPA引物对。
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