[发明专利]一种检测欧洲型PRRSV抗体效价的试剂盒及检测方法

权利要求书

1.一种编码欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白N抗原的核酸分子，其特征在于，其核苷酸序列包括与SEQ ID NO：1所示序列的同源性至少为70％的序列。

2.一种如权利要求1所述的核酸分子，其特征在于，所述核酸分子的核苷酸编码序列还包括His标签、GST标签中的一种或多种。

3.一种欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白N，其特征在于，其核苷酸编码序列包括如权利要求1所述的核酸分子。

4.一种重组载体，其特征在于，包含如权利要求1所述的核酸分子。

5.如权利要求1的核酸分子、权利要求3的欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白N或权利要求4的重组载体在检测欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用。

6.如权利要求1的核酸分子、权利要求3的欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白N或权利要求4的重组载体在检测欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体效价中的应用。

7.一种用于检测欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体效价的试剂盒，其特征在于，其组分包括如权利要求3的欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白N。

8.一种检测欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体效价的试剂盒，其特征在于，其组分包括：

1)固相载体：酶标板；

2)抗原以及抗原缓冲液：所述抗原为如权利要求3的欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒核衣壳蛋白N；

3)封闭液；

4)待检测抗体以及样品稀释液；

5)酶标二抗及二抗稀释液；

6)底物；

7)洗液；和

8)终止液。

9.一种检测欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体效价的试剂盒在检测猪血清欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒中的应用。

10.一种利用如权利要求8所述试剂盒检测欧洲型猪繁殖与呼吸综合征病毒抗体效价的方法，其特征在于，包括如下步骤：

1)包被抗原：将所述抗原以抗原缓冲液稀释后加入ELISA板中，包被过夜；

2)洗涤：弃去包被液并洗3-5遍；

3)封闭：每孔加入封闭液，室温封闭1-3小时，弃去封闭液并洗涤；

4)孵育一抗：将待测猪血清与样品稀释液混匀后加入，室温孵育0.5-2小时，弃去并洗涤；

5)孵育二抗：加入二抗稀释液稀释的HRP标记的抗IgG抗体，室温孵育20-60分钟，弃去并洗涤；

6)显色与读值：加入TMB底物溶液，室温反应5-15min后加入终止液，酶标仪读取吸收值。