[发明专利]水稻ALS突变基因、含有该基因的植物转基因筛选载体pCALSm2及其应用

权利要求书

1.水稻ALS突变蛋白，其特征在于，所述ALS突变蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。

2.一种核酸，其特征在于，其编码权利要求1所述的ALS突变蛋白。

3.一种生物材料，其特征在于，其为包含权利要求2所述核酸的表达盒、载体或宿主细胞；所述宿主细胞不包含植物细胞。

4.权利要求1所述的ALS突变蛋白或权利要求2所述的核酸或权利要求3所述的生物材料的如下任一应用：

(1)在使植物具有ALS抑制剂类除草剂抗性或提高植物对ALS抑制剂类除草剂抗性中的应用；

(2)在制备转基因植物中的应用；

(3)在植物种质资源改良中的应用；

(4)在作为植物遗传转化的筛选标记或构建植物遗传转化筛选载体中的应用。

5.一种植物转基因筛选表达盒，其特征在于，以植物内源基因作为筛选标记，所述植物内源基因为ALS突变基因；所述水稻ALS突变基因的编码蛋白为权利要求1所述的ALS突变蛋白。

6.根据权利要求5所述的植物转基因筛选表达盒，其特征在于，所述表达盒还包含用于启动和终止所述ALS突变基因转录的启动子和终止子；

所述启动子为水稻ALS基因启动子，水稻或玉米的Ubi启动子、Actin启动子、Rubisco小亚基启动子或Cab启动子；

所述终止子为水稻ALS基因终止子或Ubi终止子。

7.根据权利要求6所述的植物转基因筛选表达盒，其特征在于，所述启动子为水稻ALS基因启动子；所述终止子为水稻Ubi终止子。

8.根据权利要求7所述的植物转基因筛选表达盒，其特征在于，所述表达盒的核苷酸序列如SEQ ID NO.3所示。

9.一种植物遗传转化筛选载体，其特征在于，含有权利要求5～8任一项所述的植物转基因筛选表达盒。

10.根据权利要求9所述的植物遗传转化筛选载体，其特征在于，所述植物遗传转化筛选载体为植物双元表达载体，可通过克隆其他表达盒进入该载体进行遗传转化；

所述其他表达盒为除权利要求5～8任一项所述的植物转基因筛选表达盒之外的表达盒。

11.根据权利要求10所述的植物遗传转化筛选载体，其特征在于，所述植物遗传转化筛选载体的核苷酸序列如SEQ ID NO.4所示。

12.权利要求5～8任一项所述的植物转基因筛选表达盒或权利要求9～11任一项所述的植物遗传转化筛选载体在植物遗传转化中的应用。

13.根据权利要求12所述的应用，其特征在于，所述应用包括：将所述植物转基因筛选表达盒或所述植物遗传转化筛选载体转入植物愈伤组织后，在筛选阶段采用含有除草剂的筛选培养基进行抗性筛选；

所述筛选培养基中，含有0.25～1μmol/L双草醚、200～1000μg/L灭草烟或300～1000μg/L咪唑乙烟酸；

和/或，所述应用包括：在植物转基因筛选表达盒或植物遗传转化筛选载体转入植物愈伤组织后的分化阶段，采用含有除草剂的分化培养基进行分化培养；

所述分化培养基中，含有0.05～1μmol/L双草醚、25～1000μg/L灭草烟或25～1000μg/L咪唑乙烟酸；

和/或，

所述应用包括：在植物转基因筛选表达盒或植物遗传转化筛选载体转入植物愈伤组织后的生根阶段，采用含有除草剂的生根培养基进行生根培养；

所述生根培养基中，含有0.05～10μmol/L双草醚、25～1000μg/L灭草烟或25～1000μg/L咪唑乙烟酸。