[发明专利]一种毕赤酵母中EHT1基因进化关系分析的实验方法在审

专利信息
申请号: 202010347629.9 申请日: 2020-04-28
公开(公告)号: CN111518939A 公开(公告)日: 2020-08-11
发明(设计)人: 陈嘉;冯志宏;焦旋;高振峰;施俊凤;杨志国;张立新;秦一帆;张茜;闫钊 申请(专利权)人: 山西省农业科学院农产品贮藏保鲜研究所
主分类号: C12Q1/6895 分类号: C12Q1/6895;C12Q1/04;C12R1/84
代理公司: 北京集智东方知识产权代理有限公司 11578 代理人: 吴倩
地址: 030031 山*** 国省代码: 山西;14
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摘要:
搜索关键词: 一种 酵母 eht1 基因 进化 关系 分析 实验 方法
【权利要求书】:

1.一种毕赤酵母中EHT1基因进化关系分析的实验方法,其特征在于:包括以下步骤:

S1、复活菌株GS115和pPIC9K;

S2、培养菌株GS115和pPIC9K;

S3、合成EHT1引物;

S4、提取及鉴定菌株GS115和pPIC9K的总RNA;

S5、反转录毕赤酵母总RNA,并扩增EHT1 CDS区。

2.如权利要求1所述的一种毕赤酵母中EHT1基因进化关系分析的实验方法,其特征在于:步骤S1具体包括:

将菌株GS115和pPIC9K冻干管从4℃冰箱冷藏室取出,75%酒精棉擦拭冻干管表面,将管顶端用酒精灯外焰均匀加热;

在冻干管加热部位立即滴加2–3滴无菌水;

移取500μL5°Bé麦芽汁液体培养基加入冻干管中,使菌株GS115和pPIC9K冻干粉全部溶解;

将溶解后的菌株GS115和pPIC9K悬浮液转移到5mLEP管中,加入5,000μL5°Bé麦芽汁液体培养基,混匀。

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