[发明专利]一种β-半乳糖苷酶GalA及其应用

说明书

本发明涉及一种β‑半乳糖苷酶GalA及其应用。所述β‑半乳糖苷酶GalA氨基酸序列如SEQ ID NO.1所示。本发明提供一种所述β‑半乳糖苷酶GalA的重组表达及纯化制备方法，发酵液酶活力可达3795.6 U/mL，一步纯化纯度97%，回收率为79.5%。本发明所述β‑半乳糖苷酶GalA具有良好的热稳定性和储存稳定性，最适反应温度为50℃，在50℃下持续孵育24 h仍保留89.7%的酶活力，室温下（30℃）储存30天，仍然能保留81.5%的酶活力。本发明所述β‑半乳糖苷酶GalA活力高、稳定性好，降解乳糖能力强，具有良好的应用潜质。

技术领域

本发明涉及一种β-半乳糖苷酶GalA及其应用，属于生物技术领域。

背景技术

β-半乳糖苷酶（EC 3.2.1.23）是一种糖苷水解酶，可催化乳糖水解和转半乳糖基化反应。作为一种常用的医用酶，β-半乳糖苷酶已广泛用于乳制品行业中将乳糖分解为半乳糖和葡萄糖。此外，β-半乳糖苷酶还可以在乳糖或其他与结构相关的半乳糖苷水解过程中通过转糖基化作用产生半乳糖寡糖。β-半乳糖苷酶可广泛用于营养和食品加工。

β-半乳糖苷酶的水解活性已经在食品工业中使用了数十年，以帮助吸收未消化的乳糖。全世界，特别是在东亚，许多儿童和成人正面临乳糖消化不良和乳糖酶缺乏引起的不耐受的问题。这些疾病背后的原因是小肠中β-半乳糖苷酶活性降低或合成降低。患有乳糖不耐症的人只能食用不含或很少乳糖的乳制品。为了克服乳糖不耐症带来的局限性，可以通过降解牛奶中的乳糖来使牛奶中的乳糖降解。此外，人们在食用奶制品之前服用含有β-半乳糖苷酶的药物，这也可以有效降低乳糖浓度。在食品工业中，β-半乳糖苷酶的水解活性还被用于减少冰淇淋和炼乳中的结晶。

尽管β-半乳糖苷酶已从多种生物中纯化和鉴定，例如细菌，真菌，酵母，植物和哺乳动物等。由于产量，稳定性，降解效率等问题，能够用于商品化应用的β-半乳糖苷酶仍然很少。而且，目前市场上销售的β-半乳糖苷酶价格昂贵、品种单一，无法满足特定条件下的应用，因此急需开发新的β-半乳糖苷酶。

发明内容

本发明针对现有技术的不足，提供了一种β-半乳糖苷酶GalA及其制备方法。本发明提供一种所述β-半乳糖苷酶GalA的重组表达及纯化制备方法，发酵液酶活力可达3795.6U/mL，一步纯化纯度97%，回收率为79.5%。本发明所述β-半乳糖苷酶GalA具有良好的热稳定性和储存稳定性，最适反应温度为50 ℃，在50 ℃下持续孵育24 h仍保留89.7%的酶活力，常温（30 ℃）下储存30天，仍然能保留81.5%的酶活力。本发明所述β-半乳糖苷酶GalA活力高、稳定性好，降解乳糖能力强，具有良好的应用潜质。

一方面，本发明提供一种β-半乳糖苷酶GalA，其氨基酸序列如SEQ ID NO. 1所示。

SEQ ID NO.1：