[发明专利]一种快速获得毛囊细胞源外泌体的方法

权利要求书

1.一种快速获得毛囊细胞源外泌体的方法，其特征在于：该快速获得毛囊细胞源外泌体的方法的具体步骤如下：

S1：2D毛囊细胞培养：首先采用2D培养的方式将毛囊细胞培养，直至毛囊细胞扩增至5x10⁵个；

S2：2D毛囊细胞转入旋转瓶：称取5x10⁵个毛囊细胞所需量的微载体，对微载体高压灭菌，之后，将微载体装入旋转瓶中，根据步骤S1中，当毛囊细胞扩增至5x10⁵个时，将毛囊细胞转入装有微载体的旋转瓶中培养；

S3：旋转瓶旋转：根据步骤S2，将装有毛囊细胞、微载体的旋转瓶放置在生物反应器中，设定生物反应器的转速为200-300r/min，生物反应器的转动时间为3-5min；

S4：转入培养箱培养：根据步骤S3中，在生物反应器中转动处理后的装有毛囊细胞、微载体的旋转瓶取出并置于培养箱中培养，且培养箱的环境温度设定为35摄氏度-39摄氏度，培养箱内CO₂的含量为0.04％-0.06％；

S5：提取上清液：当培养箱内毛囊细胞培养至对数生长期时，更换无血清培养基，22-24h后即可收取上清，进行外泌体的提取。

2.根据权利要求1所述的一种快速获得毛囊细胞源外泌体的方法，其特征在于：所述旋转瓶为500ml容量的旋转瓶。

3.根据权利要求1所述的一种快速获得毛囊细胞源外泌体的方法，其特征在于：所述步骤S1中2D培养在T75培养瓶中进行。

4.根据权利要求1所述的一种快速获得毛囊细胞源外泌体的方法，其特征在于：所述步骤S2中高压灭菌的压强不小于103.4kPa，温度不低于121.3摄氏度，且高压灭菌的时间为15-30min。

5.根据权利要求1所述的一种快速获得毛囊细胞源外泌体的方法，其特征在于：所述毛囊细胞包括间充质干细胞、黑色素细胞、角朊干细胞。