[发明专利]一种光控骨形成蛋白受体系统OptoBMPR及其构建方法和应用有效
| 申请号: | 202010267510.0 | 申请日: | 2020-04-08 |
| 公开(公告)号: | CN112342241B | 公开(公告)日: | 2021-11-12 |
| 发明(设计)人: | 张翠萍;胡文治;马奎;付小兵 | 申请(专利权)人: | 中国人民解放军总医院第四医学中心 |
| 主分类号: | C12N15/861 | 分类号: | C12N15/861;C12N15/12;C12N5/10;C12N7/01 |
| 代理公司: | 北京方圆嘉禾知识产权代理有限公司 11385 | 代理人: | 朱玲艳 |
| 地址: | 100039*** | 国省代码: | 北京;11 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 一种 光控 形成 蛋白 受体 系统 optobmpr 及其 构建 方法 应用 | ||
1.一种光控骨形成蛋白受体系统OptoBMPR,其特征在于,所述光控骨形成蛋白受体系统包括表达骨形成蛋白I型受体OptoBR1的第一重组质粒和表达骨形成蛋白II型受体OptoBR2的第二重组质粒;所述骨形成蛋白I型受体OptoBR1的氨基酸序列如SEQ ID No.1所示;所述骨形成蛋白II型受体OptoBR2的氨基酸序列如SEQ ID No.2所示。
2.根据权利要求1所述的光控骨形成蛋白受体系统,其特征在于,所述骨形成蛋白I型受体OptoBR1的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.3所示;所述骨形成蛋白II型受体OptoBR2的编码基因的核苷酸序列如SEQ ID No.4所示。
3.根据权利要求1或2所述的光控骨形成蛋白受体系统,其特征在于,所述第一重组质粒和第二重组质粒的构建用骨架载体分别包括腺病毒。
4.根据权利要求3所述的光控骨形成蛋白受体系统,其特征在于,所述光控骨形成蛋白受体系统还包括腺病毒包装细胞。
5.根据权利要求4所述的光控骨形成蛋白受体系统,其特征在于,所述腺病毒包装细胞包括胚胎肾细胞。
6.权利要求1~5任意一项所述光控骨形成蛋白受体系统的构建方法,包括以下步骤:
1)将表达骨形成蛋白I型受体OptoBR1的编码基因插入第一构建用骨架质粒,得到第一重组质粒;
2)将表达骨形成蛋白II型受体OptoBR2的编码基因插入第二构建用骨架质粒,得到第二重组质粒;
所述步骤1)和步骤2)之间没有时间顺序限制。
7.权利要求1~5任意一项所述光控骨形成蛋白受体系统在激活细胞内BMP/Smad 1/5/8信号通路中的应用。
8.根据权利要求7所述的应用,其特征在于,所述应用包括以下步骤:
利用光控骨形成蛋白受体系统中的第一重组质粒和第二重组质粒共转染表皮干细胞,得到转基因细胞,采用460nm蓝光对转基因细胞辐射30s~24h,激活转基因细胞内BMP/Smad1/5/8信号通路。
9.根据权利要求8所述的应用,其特征在于,所述460nm蓝光的辐射强度为0.1~100μW·cm-2。
10.权利要求1~5任意一项所述光控骨形成蛋白受体系统在制备激活细胞内BMP/Smad1/5/8信号通路的制剂中的应用。
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