[发明专利]耐药性乳腺癌治疗药物及其筛选方法

说明书

本发明涉及一种耐药性乳腺癌药物筛选方法以及得到的有效治疗药物，所述筛选方法包括选择耐药乳腺癌细胞株以及确认细胞株对于抗乳腺癌药物的抗性，并选择参比药物；检测待筛药物对参比药物抑制细胞凋亡的影响效果，对耐药细胞糖酵解水平的影响以及对耐药细胞线粒体的影响，筛选得到的综合评价优异的黄芩素是一种有效的抗乳腺癌药物增敏剂，说明本发明的筛选方法尤其适用于针对特定的耐药性药物，得到匹配的增敏性药物，从而有利于针对特定耐药乳腺癌患者进行精准化医学治疗。

技术领域

本发明属于药物领域，具体涉及一种耐药性乳腺癌药物筛选方法以及得到的有效治疗药物。

背景技术

乳腺癌是严重威胁全世界女性健康的第一大恶性肿瘤。近几十年来，乳腺癌治疗技术有了较大的发展，抗乳腺癌一线治疗药物层出不穷，但是耐药性的发生在很大程度上阻扰了乳腺癌治疗的有效性。肿瘤耐药的产生可分为原发性耐药和获得性耐药，根据肿瘤细胞的耐药特点，其获得性耐药可分为原药耐药(primary drug resistance，PDR)和多药耐药(multidrug resistance，MDR)两大类。PDR是指仅对诱导药物产生交叉耐药；而MDR是指肿瘤细胞对一种抗肿瘤药物产生抗药性的同时，对结构和作用机制不同的抗肿瘤药物产生交叉耐药性，又称多向性耐药(pleiotropic drug resistance)。MDR是肿瘤化疗失败的主要原因，也是困扰肿瘤治疗的一大难题。因此，克服肿瘤细胞MDR，提高抗癌药物疗效已成为肿瘤治疗亟待解决的关键性课题。

近年来，国内外对天然药物逆转肿瘤耐药的研究取得了较大进展，筛选得到多种植物源多酚、黄酮、萜类成分具有逆转肿瘤耐药的功效，且天然产物往往毒副作用小，且同时具有调节免疫性，抗氧化，抗自由基，调节自噬，抑制增殖，周期阻滞，诱导凋亡或分化，从多种机制靶点抑制肿瘤细胞活性的特点。从植物源天然成分中筛选得到具有乳腺癌化疗增敏作用以及降低乳腺癌耐药性的药物是抗乳腺癌药物研发的重要思路之一，但也正因为天然产物作用机理的复杂性，需要摸索构建合适的体外耐药细胞的药理筛选模型，针对乳腺癌药物产生耐药性以及效果减低的多种可能的药物通路的评价以及综合评分，找到一种普适性的、可筛选得到对乳腺癌耐药患者具有有效治疗效果或者对乳腺癌一线药物具有增敏作用的天然产物源药物的方法，从而可以快速、高效的从已知的天然抗肿瘤化合物库中进一步得到有益于耐药乳腺癌进展控制的药物，尤其是筛选得到对耐药乳腺癌已有治疗药物具有增敏作用，且有利于多靶点综合作用，降低乳腺癌患者复发率，提高存活率的治疗药剂。

黄芩素是中药黄芩的有效成分之一，具有较强的抗肿瘤活性，有着良好的应用前景和研究价值。已有研究发现黄芩素能够抑制乳腺癌的增殖、诱导凋亡以及抑制转移。因此，进一步深入研究黄芩素在乳腺癌治疗中作用机制，以及发现其对抗癌药物的增敏作用，有助于将其开发成为应用于对乳腺癌治疗已经产生耐药性患者的治疗增敏药物以及通过对其增敏机制的发现，进一步开发对产生耐药性的乳腺癌患者具有有效治疗效果或者对乳腺癌一线药物具有增敏作用的药物的筛选、预测模型和方法。

发明内容

为解决现有技术中存在的问题，本发明首先提供一种药物筛选方法，其特征在于，包括如下步骤：

(1)选择耐药乳腺癌细胞株以及确认细胞株对于抗乳腺癌药物的抗性，并选择参比药物：采用MTT法测定耐药乳腺癌细胞株对抗乳腺癌药物的耐药倍数N，抗性达到N大于等于2的作为参比药物；

(2)检测待筛药物对参比药物抑制细胞凋亡的影响效果；

(3)检测待筛药物对耐药细胞糖酵解水平的影响；

(4)测试待筛药物联用参比药物对耐药细胞线粒体的影响；