[发明专利]一种冠状病毒核酸检测试剂盒及其检测方法

说明书

本发明涉及生物检测技术领域，公开了一种冠状病毒核酸检测试剂盒，包括试剂盒本体，试剂盒本体内嵌入式设计有收纳块，收纳块内放置有第一试管、第二试管、第三试管和第四试管，第一试管内装有SARS‑CoV‑2_PCR反应液，第二试管内装有SARS‑CoV‑2_PCR酶混合液，第三试管内装有SARS‑CoV‑2阳性质控品，第四试管内装有SARS‑CoV‑2阴性质控品，SARS‑CoV‑2_PCR反应液、SARS‑CoV‑2_PCR酶混合液、SARS‑CoV‑2阳性质控品和SARS‑CoV‑2阴性质控品配合RNA提取试剂盒、荧光定量PCR仪、涡旋混匀仪、离心机和PCR反应管进行使用，以此检测RNA样品的阴性和阳性；本发明具有能够快速、准确、定量的检测冠状病毒的特点。

技术领域

本发明涉及生物检测技术领域，具体涉及一种冠状病毒核酸检测试剂盒及其检测方法。

背景技术

冠状病毒(Coronaviruses，CoV)属于冠状病毒科(Coronaviridae)冠状病毒亚科(Coronavirinae)，是一种有囊膜的单股正链RNA病毒，拥有已知RNA 病毒中最大的基因组序列长度。

发明内容

有鉴于此，本发明提供一种冠状病毒核酸检测试剂盒及其检测方法。

为了解决上述技术问题，本发明的技术方案是：一种冠状病毒核酸检测试剂盒，包括试剂盒本体，所述试剂盒本体内嵌入式设计有收纳块，收纳块内放置有第一试管、第二试管、第三试管和第四试管，第一试管内装有SARS-CoV- 2_PCR反应液，第二试管内装有SARS-CoV-2_PCR酶混合液，第三试管内装有 SARS-CoV-2阳性质控品，第四试管内装有SARS-CoV-2阴性质控品。

优选的，所述SARS-CoV-2_PCR反应液的组成成分包括dNTPs、MgCL2、 Tris-HCL、引物探针和UNG酶。

优选的，所述SARS-CoV-2_PCR酶混合液的组成成分包括Tap DNA聚合酶和逆转录酶。

优选的，所述SARS-CoV-2阳性质控品的组成成分包括阳性模板。

优选的，所述SARS-CoV-2阴性质控品的组成成分包括阴性模板。

另一方面提供了采用上述冠状病毒核酸检测试剂盒的检测方法，包括准备 RNA提取试剂盒、荧光定量PCR仪、涡旋混匀仪、离心机和PCR反应管；

具体步骤为：

第一步，使用RNA提取试剂盒提取新鲜采集的血清、血浆或咽拭子样本中的RNA，且保证提取出的RNA质量和数量满足实验要求，提取出的RNA样品应立即检测或于-70℃以下保存；

第二步，将第一试管、第二试管、第三试管和第四试管进行短暂振荡后，放入离心机内离心数秒，若第一试管、第二试管、第三试管和第四试管在- 70℃以下环境保存，需先提前30min将RNA样品取出，待室温融合后，方可进行振荡离心；振荡离心完毕后，确定反应数和需加入SARS-CoV-2_PCR反应液、SARS-CoV-2_PCR酶混合液的量；

第三步，取1.5ml无菌离心管，将SARS-CoV-2_PCR反应液和SARS-CoV- 2_PCR酶混合液加入无菌离心管中，使用涡旋混匀仪混匀后，再使用离心机离心数秒，配制混合溶液；

第四步，将配制完的混合溶液以20ul/管分装至PCR反应管内；

第五步，将取5ul SARS-CoV-2阳性质控品、5ul SARS-CoV-2阴性质控品和5ul RNA样品分别加入不同的PCR反应管内，盖紧管盖后使用离心机短暂离心，令管壁上的液体全部甩至管底后，立即将PCR反应管放入荧光定量PCR仪内进行PCR反应；