[发明专利]一种酶结合物稀释液、一种AMH定量检测试剂盒及其使用方法

权利要求书

1.一种酶结合物稀释液，其特征在于：包括EDTA、酪蛋白、缓冲液、保护蛋白。

2.根据权利要求1所述的酶结合物稀释液，其特征在于：EDTA为EDTA-2K，缓冲液为Tris-NaCl缓冲液或PBS缓冲液，保护蛋白为小牛血清、牛血清白蛋白、Casein中的至少一种。

3.根据权利要求2所述的酶结合物稀释液，其特征在于：每升酶结合物稀释液中含有EDTA-2K 5.8-7g、酪蛋白7-13g。

4.根据权利要求1所述的酶结合物稀释液，其特征在于：还包括防腐剂。

5.根据权利要求4所述的酶结合物稀释液，其特征在于：防腐剂为Proclin 300、NaN3、卡松中的至少一种。

6.一种AMH定量检测试剂盒，其特征在于：包括包被有抗AMH单克隆抗体的包被板、含有酶标记的抗AMH单克隆抗体的酶结合物和AMH校准品，根据权利要求1-5任一权利要求所述的酶结合物稀释液与酶标记抗AMH单克隆抗体按体积比为（7800-8300）:1的比例混合得到酶结合物。

7.根据权利要求6所述的AMH定量检测试剂盒，其特征在于：包被板制备过程中的缓冲液为Tris-NaCl缓冲液或PBS缓冲液，所用的抗AMH的单克隆抗体的浓度为2-10ug/ml，所用的封闭液是BSA—PBS溶液；校准品的稀释液包括缓冲液、保护蛋白、防腐剂和庆大霉素；缓冲液为HEPES缓冲液，保护蛋白牛血清白蛋白、Casein中的至少一种，防腐剂为Proclin300、NaN3、卡松中的至少一种。

8.根据权利要求6所述的AMH定量检测试剂盒，其特征在于：酶标记的抗AMH单克隆抗体的酶结合物为HRP标记的抗AMH单克隆抗体的酶结合物。

9.根据权利要求6所述的AMH定量检测试剂盒，其特征在于：校准品分别为包含0ng/ml、0.5ng/ml、2ng/ml、5ng/ml、10ng/ml、25ng/ml浓度AMH的校准品。

10.根据权利要求6-9任一权利要求所述的AMH定量检测试剂盒的使用方法，其特征在于：包括以下步骤，

（1）加样：取出一定量的包被板上编号的包被孔，依次加入50µl校准品及待测样本，然后分别加入50µl系统反应液，再加入酶结合物50µl；

（2）温育：将加样后的包被板置37℃环境温度下60分钟；

（3）洗涤：甩去包被孔内液体，用稀释后的洗涤液注满各包被孔，静置20秒，甩掉，如此反复洗涤5次，每次均需甩净液体，最后在吸水纸上拍干；

（4）显色：每包被孔加底物液100µl，18-23℃下避光反应20分钟；

（5）终止：每包被孔加终止液50µl，终止反应。