[发明专利]一种索玛鲁肽的半合成制备法

权利要求书

1.一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，该方法包括以下步骤：

步骤1，将下式化合物Ⅰ和如SEQ NO:1所示的Arg34 GLP-1(11-37)通过化学连接反应偶联、酸解得到如SEQ NO:2所示的化合物ⅡAib8,Arg34 GLP-1(7-37)；

步骤2，将化合物17-((S)-1-叔丁氧基羰基-3-{2-[2-({2-[2-(羧基甲氧基)乙氧基]乙基氨基甲酰基}甲氧基)乙氧基]乙基氨基甲酰基}丙基氨基甲酰基)十七烷酸叔丁酯进行活化酯反应得到下列化合物Ⅲ；

步骤3，将化合物Ⅲ连接到化合物Ⅱ序列中26位Lys的侧链氨基，反应得到化合物Ⅳ；

步骤4，化合物Ⅳ进行脱保护、冰乙醚沉淀、纯化、冻干、最终得到索玛鲁肽。

2.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，步骤1所述的化合物Ⅰ的合成步骤为：

步骤1-1，Boc-His(Trt)-Aib-Glu(otbu)-Gly-OH与水杨醛二甲缩醛在PyBOP、DIEA、0℃反应温度下偶联得到中间产物Boc-His(Trt)-Aib-Glu(otbu)-Gly-O-水杨醛二甲缩醛，即化合物0；

步骤1-2，对化合物0进行全脱保护、冰乙醚沉淀、纯化后冻干，得到化合物Ⅰ。

3.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，步骤1所述如SEQ NO:1所示的Arg34 GLP-1(11-37)来源于微生物发酵。

4.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，步骤1所述反应在醋酸吡啶的缓冲体系下进行，所述吡啶、醋酸摩尔比为1：0～120；所述反应的温度在20-55℃进行。

5.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，步骤3所述反应在的硼酸缓冲体系中进行，pH范围为8～11；所述的缓冲体系中硼酸浓度为0.01mol/L～0.1mol/L。

6.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，步骤3所述反应中化合物Ⅲ匀速滴加到化合物Ⅱ中。

7.根据权利要求1或6所述的一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，步骤3所述反应中化合物Ⅲ在0.1～1小时内匀速滴加到化合物Ⅱ中。

8.根据权利要求1所述的一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，步骤4所述脱保护的方法为使用切割试剂处理，所述切割试剂为TFA、H₂O与TIPS一组或者TFA、TIS、H₂O与DODT一组。

9.根据权利要求8所述的一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，所述切割试剂TFA、H₂O与TIPS的体积比为95:2.5:2.5；所述切割试剂TFA、TIS、H₂O与DODT的体积比为92.5:2.5:2.5:2.5。

10.根据权利要求1或4所述的一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，步骤1所述反应在醋酸吡啶的缓冲体系下进行，所述吡啶、醋酸摩尔比为1：120；所述反应的温度在35℃进行。

11.根据权利要求1或5所述的一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，步骤3所述反应在的硼酸缓冲体系中进行，pH范围为9；所述的缓冲体系中硼酸浓度为0.05mol/L。

12.根据权利要求1或6所述的一种索玛鲁肽的制备方法，其特征在于，步骤3所述反应中化合物Ⅲ在0.5小时内匀速滴加到化合物Ⅱ中。