[发明专利]一种检测弓形虫IgG抗体的酶联免疫试剂盒及方法

权利要求书

1.一种检测弓形虫的间接酶联免疫试剂盒，包括如下组分：

1）、抗原TgGRA54蛋白和包被液、或抗原TgGRA54蛋白溶液和包被液、或包被TgGRA54蛋白的酶标板；

所述TgGRA54蛋白为如下a或b：

a）序列表中序列2所示的蛋白质；

b）序列表中序列2第35-416位氨基酸所示的蛋白质。

2.根据权利要求1所述的试剂盒，其特征在于：

所述抗原TgGRA54蛋白或所述抗原TgGRA54蛋白溶液的包被浓度为2.5μg/mL；

或所述包被TgGRA54蛋白的酶标板中每孔TgGRA54蛋白含量为0.25μg。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述包被液为Tris-HCl缓冲液。

4.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其特征在于：所述试剂盒还包括如下组分：

2）封闭液：体积百分含量为5%的马血清溶液；

3）用于稀释待测样品的血清或血清标准品的稀释液；所述稀释液为封闭液；

4）结合待测样品的酶标二抗；

5）显色液；

6）弓形虫阳性牛血清标准品和弓形虫阴性牛血清标准品。

5.根据权利要求4所述的酶联免疫试剂盒，其特征在于：

所述试剂盒还包括7）记载判断标准的可读载体；

所述判断标准如下：若待测样本OD450值≥0.306，则待测样本含有或候选含有弓形虫抗体，若待测样本OD450值小于0.306，则待测样本不含有或候选不含有弓形虫抗体；

或，所述试剂盒还包括8）记载如下方法的可读载体；

所述方法包括如下步骤：

1）包被：用Tris-HCl缓冲液将抗原TgGRA54蛋白溶液稀释至2.5μg/mL，按照每孔100μL加入酶标板中，包被；

2）封闭：加入5%马血清溶液作为封闭液进行封闭；

3）加待测样品：将待测样品的血清、弓形虫阳性牛血清标准品和弓形虫阴性牛血清标准品分别用封闭液进行1:200梯度稀释；反应；

4）加酶标二抗：取结合待测样品的血清的酶标二抗用封闭液1:10000稀释，加入酶标板孔孵育；

5）显色：将底物显色液加入显色；

6）终止：加入终止液；

7）读数：在酶标仪上读出OD值；

若待测样本OD450值≥0.306，则待测样本含有或候选含有IgG抗体，

若待测样本OD450值小于0.306，则待测样本不含有或候选不含有IgG抗体。

6.制备权利要求4或5所述的酶联免疫试剂盒的方法，其特征在于：将试剂盒中所述组分分别单独包装。

7.权利要求1中的抗原TgGRA54蛋白在如下1）-3）中至少一种中的应用：

1）制备检测或辅助检测待测样品中是否含有弓形虫IgG抗体产品中的应用；

2）制备检测或辅助检测待测样品是否感染弓形虫产品中的应用；

3）制备诊断或辅助诊断弓形虫病产品中的应用。

8.权利要求1-5中任一所述的酶联免疫试剂盒在制备检测或辅助检测待测样品中是否含有弓形虫IgG抗体产品中的应用。