[发明专利]一种酶法合成西那卡塞中间体(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法

说明书

本发明公开了一种酶法合成西那卡塞中间体(R)‑1‑(1‑萘基)乙胺的方法，所用D‑氨基酸脱氢酶的基因序列和氨基酸序列如SEQ ID NO.1和NO.2所示，可通过构建大肠杆菌基因工程菌和发酵培养大量制备；在pH6.5～8.5的磷酸钾缓冲液中分别加入50～300mmol/L 1‑萘乙酮浓度，100～600mmol/L氨基供体，0.1‑0.5g/L辅酶，5％‑10％(V/V)助溶剂,1～3g/L辅酶循环酶，0.5～2g/L D‑氨基酸脱氢酶，在30～40℃下进行反应24～48h，生成(R)‑1‑(1‑萘基)乙胺，最终反应转化率大于95％，产物收率大于88％，产物手性纯度达到99％ee。本发明反应条件温和，有机溶剂用量小，反应体系更绿色环保，转化率高，大大提高了(R)‑1‑(1‑萘基)乙胺的制备效率，具有较好的工业应用前景。

技术领域

本发明属于生物催化领域，具体涉及到一种酶法合成西那卡塞中间体(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法。

背景技术

(R)-1-(1-萘基)乙胺是盐酸西那卡塞(Cinacalceti)的关键手性中间体，其结构式为：

盐酸西那卡塞是由Amgen公司研发的第二代拟钙剂药物，能激活甲状旁腺中的钙受体，从而降低甲状旁腺素(PTH)的分泌，适用于治疗进行透析的慢性肾病(CKD)患者的继发性甲状旁腺功能亢进(SPTH)、甲状旁腺癌患者的高血钙症和治疗不能接受甲状旁腺切除术的原发性甲状旁腺功能亢进引起的严重高血钙症。

目前，(R)-1-(1-萘基)乙胺的合成方法主要分为不对称拆分法和不对称合成法。不对称拆分法主要以1-(1-萘基)乙胺消旋体为原料，通过化学拆分剂或者酶拆分获得手性纯(R)-1-(1-萘基)乙胺，此方法理论产率最高仅为50％。WO2008058235中以1-萘乙酮为原料经还原胺化得到1-(1-萘基)乙胺消旋体，再经D-(+)-萘普生拆分获得(R)-1-(1-萘基)乙胺，该方法存在拆分剂价格贵，反应步骤多，有机试剂用量大等缺点。CN103420845B采用D-酒石酸作为拆分剂，制备过程需使用大量有机试剂甲醇，经拆分萃取后收率仅为37.8％。CN104630322B公开了一种酶法拆分的方法，采用南极假丝酵母脂肪酶B对1-(1-萘基)乙胺消旋体进行选择性酯化，然后将(R)-1-(1-萘基)乙胺酯化物与(S)-1-(1-萘基)乙胺分离，最后将(R)-1-(1-萘基)乙胺酯化物水解得到(R)-1-(1-萘基)乙胺，该方法步骤较多，其中选择性酯化反应还需在有机溶剂正己烷中进行，最终收率仅为47.5％。相比而言，不对称合成法主要以1-萘乙酮或1-(1-萘基)乙酮肟为原料，经不对称催化反应生成手性纯(R)-1-(1-萘基)乙胺，其理论产率可达100％。CN105294449B公开了一种(R)-1-(1-萘基)乙胺的不对称合成方法，最终产物手性纯度为96％ee，收率为90％。该方法中使用的手性催化剂氯{[(1R,2R)-(-)-2-氨-1,2-二苯乙基](4-甲苯磺酰)氨}(p-异丙基甲苯)钌(II))价格昂贵，存在重金属污染，反应需在有机溶剂中进行，不利于环境保护，同时产物手性纯度并不高。

因此，本领域亟需一种反应具有反应条件温和、效率高、立体选择性强、环境友好的(R)-1-(1-萘基)乙胺的合成方法，以期在药物合成方面具有较好的应用。

发明内容

本部分的目的在于概述本发明的实施例的一些方面以及简要介绍一些较佳实施例。在本部分以及本申请的说明书摘要和发明名称中可能会做些简化或省略以避免使本部分、说明书摘要和发明名称的目的模糊，而这种简化或省略不能用于限制本发明的范围。

鉴于上述和/或现有技术中存在的问题，提出了本发明。

因此，本发明的目的是，克服现有技术中的不足，提供一种酶法合成西那卡塞中间体(R)-1-(1-萘基)乙胺的方法。