[发明专利]用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器及检测方法有效

专利信息
申请号: 202010131900.5 申请日: 2020-02-29
公开(公告)号: CN111337449B 公开(公告)日: 2021-03-26
发明(设计)人: 刘梅川;孙欢欢;孙彩琴;丁雪;赵国华 申请(专利权)人: 同济大学
主分类号: G01N21/3577 分类号: G01N21/3577;G01N21/552;G01N27/48;G01N27/42
代理公司: 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 代理人: 吴文滨
地址: 200092 *** 国省代码: 上海;31
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摘要:
搜索关键词: 用于 检测 atz 核酸 适配体 红外 光谱 传感器 方法
【权利要求书】:

1.用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器的制备方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:

1)采用Si棱柱作为红外光窗,并在预处理后的Si棱柱表面沉积Au纳米粒子,制得AuNPs/Si红外信号增强基底;

2)通过Au-S键自组装法将阿特拉津适配体结合到Au NPs/Si红外信号增强基底表面,并利用MCH阻断Au表面剩余的活性位点,制得MCH/Aptamer/Au NPs/Si核酸适配体红外光谱传感器;

步骤2)具体为:

2-1)向阿特拉津核酸适配体溶液中加入TCEP还原二硫键,得到还原后的核酸适配体溶液;

2-2)将Au NPs/Si红外信号增强基底与光谱电解池组装,并在光谱电解池中加入的还原后的核酸适配体溶液,孵育12-48h后,制得Aptamer/Au NPs/Si红外传感界面;

2-3)加入MCH溶液并静置,使MCH占据Au NPs表面剩余的吸附位点,之后进行清洗,即得到所述的MCH/Aptamer/Au NPs/Si核酸适配体红外光谱传感器;

所述的TCEP为三(2-羧乙基)膦,所述的MCH为6-巯基-1-己醇。

2.根据权利要求1所述的用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器的制备方法,其特征在于,步骤1)中,Si棱柱的预处理过程为:先用Al2O3抛光粉对Si棱柱进行物理抛光,超声清洗后将Si棱柱置于食人鱼溶液中浸泡,后经清洗、干燥,得到表面亲水的Si棱柱;将表面亲水的Si棱柱置于NH4F水溶液中浸泡,后经清洗、干燥,得到预处理后的Si棱柱。

3.根据权利要求2所述的用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器的制备方法,其特征在于,所述的Si棱柱为(1.8-2.2)cm×(2.3-2.7)cm反射面的半圆柱棱镜,所述的NH4F水溶液中,NH4F的质量分数为35-45%。

4.根据权利要求1所述的用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器的制备方法,其特征在于,步骤1)具体为:

1-1)向Au化学镀液中加入HF并混合均匀,之后将预处理后的Si棱柱浸入Au化学镀液中,并在55-58℃下浸没反射平面,反应3-5min;

1-2)用王水将Si棱柱表面的Au膜溶解,并对Si棱柱进行清洗后,再次将Si棱柱浸入Au化学镀液中进行二次施镀,得到Au NPs/Si棱柱;

1-3)将Au NPs/Si棱柱与光谱电解池组装,在H2SO4溶液中,采用循环伏安扫描方法进行清洗,即得到所述的Au NPs/Si红外信号增强基底。

5.根据权利要求4所述的用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器的制备方法,其特征在于,步骤1-1)中,所述的Au化学镀液的配制方法为:向HAuCl4溶液中加入NaOH,超声分散溶解后,继续加入Na2SO3、Na2S2O3·5H2O及NH4Cl,并使HAuCl4、NaOH、Na2SO3、Na2S2O3及NH4Cl的浓度分别为0.025-0.035mol/L、0.05-0.15mol/L、0.25-0.35mol/L、0.08-0.12mol/L及0.08-0.12mol/L;之后调节pH值为9-10,即得到所述的Au化学镀液。

6.用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器,其特征在于,该传感器采用如权利要求1至5任一项所述的方法制备而成。

7.如权利要求6所述的核酸适配体红外光谱传感器的应用,其特征在于,所述的传感器用于检测水环境中的ATZ浓度。

8.采用如权利要求6所述的核酸适配体红外光谱传感器对水环境中的ATZ进行检测的方法,其特征在于,该方法为:在N2氛围下,向MCH/Aptamer/Au NPs/Si核酸适配体红外光谱传感器表面加入PBS缓冲液并静置20-30min,待收集背景后,将一系列不同浓度的ATZ标准缓冲液加入至MCH/Aptamer/Au NPs/Si核酸适配体红外光谱传感器表面并作用55-65min,待饱和吸附后再进行红外光谱测定,根据ATZ红外特征吸收峰的强度与ATZ标准缓冲液中ATZ浓度的对数关系绘制工作曲线,之后根据绘制的工作曲线,对水环境中的ATZ进行检测。

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