[发明专利]用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器及检测方法有效
| 申请号: | 202010131900.5 | 申请日: | 2020-02-29 |
| 公开(公告)号: | CN111337449B | 公开(公告)日: | 2021-03-26 |
| 发明(设计)人: | 刘梅川;孙欢欢;孙彩琴;丁雪;赵国华 | 申请(专利权)人: | 同济大学 |
| 主分类号: | G01N21/3577 | 分类号: | G01N21/3577;G01N21/552;G01N27/48;G01N27/42 |
| 代理公司: | 上海科盛知识产权代理有限公司 31225 | 代理人: | 吴文滨 |
| 地址: | 200092 *** | 国省代码: | 上海;31 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 用于 检测 atz 核酸 适配体 红外 光谱 传感器 方法 | ||
1.用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器的制备方法,其特征在于,该方法包括以下步骤:
1)采用Si棱柱作为红外光窗,并在预处理后的Si棱柱表面沉积Au纳米粒子,制得AuNPs/Si红外信号增强基底;
2)通过Au-S键自组装法将阿特拉津适配体结合到Au NPs/Si红外信号增强基底表面,并利用MCH阻断Au表面剩余的活性位点,制得MCH/Aptamer/Au NPs/Si核酸适配体红外光谱传感器;
步骤2)具体为:
2-1)向阿特拉津核酸适配体溶液中加入TCEP还原二硫键,得到还原后的核酸适配体溶液;
2-2)将Au NPs/Si红外信号增强基底与光谱电解池组装,并在光谱电解池中加入的还原后的核酸适配体溶液,孵育12-48h后,制得Aptamer/Au NPs/Si红外传感界面;
2-3)加入MCH溶液并静置,使MCH占据Au NPs表面剩余的吸附位点,之后进行清洗,即得到所述的MCH/Aptamer/Au NPs/Si核酸适配体红外光谱传感器;
所述的TCEP为三(2-羧乙基)膦,所述的MCH为6-巯基-1-己醇。
2.根据权利要求1所述的用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器的制备方法,其特征在于,步骤1)中,Si棱柱的预处理过程为:先用Al2O3抛光粉对Si棱柱进行物理抛光,超声清洗后将Si棱柱置于食人鱼溶液中浸泡,后经清洗、干燥,得到表面亲水的Si棱柱;将表面亲水的Si棱柱置于NH4F水溶液中浸泡,后经清洗、干燥,得到预处理后的Si棱柱。
3.根据权利要求2所述的用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器的制备方法,其特征在于,所述的Si棱柱为(1.8-2.2)cm×(2.3-2.7)cm反射面的半圆柱棱镜,所述的NH4F水溶液中,NH4F的质量分数为35-45%。
4.根据权利要求1所述的用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器的制备方法,其特征在于,步骤1)具体为:
1-1)向Au化学镀液中加入HF并混合均匀,之后将预处理后的Si棱柱浸入Au化学镀液中,并在55-58℃下浸没反射平面,反应3-5min;
1-2)用王水将Si棱柱表面的Au膜溶解,并对Si棱柱进行清洗后,再次将Si棱柱浸入Au化学镀液中进行二次施镀,得到Au NPs/Si棱柱;
1-3)将Au NPs/Si棱柱与光谱电解池组装,在H2SO4溶液中,采用循环伏安扫描方法进行清洗,即得到所述的Au NPs/Si红外信号增强基底。
5.根据权利要求4所述的用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器的制备方法,其特征在于,步骤1-1)中,所述的Au化学镀液的配制方法为:向HAuCl4溶液中加入NaOH,超声分散溶解后,继续加入Na2SO3、Na2S2O3·5H2O及NH4Cl,并使HAuCl4、NaOH、Na2SO3、Na2S2O3及NH4Cl的浓度分别为0.025-0.035mol/L、0.05-0.15mol/L、0.25-0.35mol/L、0.08-0.12mol/L及0.08-0.12mol/L;之后调节pH值为9-10,即得到所述的Au化学镀液。
6.用于检测ATZ的核酸适配体红外光谱传感器,其特征在于,该传感器采用如权利要求1至5任一项所述的方法制备而成。
7.如权利要求6所述的核酸适配体红外光谱传感器的应用,其特征在于,所述的传感器用于检测水环境中的ATZ浓度。
8.采用如权利要求6所述的核酸适配体红外光谱传感器对水环境中的ATZ进行检测的方法,其特征在于,该方法为:在N2氛围下,向MCH/Aptamer/Au NPs/Si核酸适配体红外光谱传感器表面加入PBS缓冲液并静置20-30min,待收集背景后,将一系列不同浓度的ATZ标准缓冲液加入至MCH/Aptamer/Au NPs/Si核酸适配体红外光谱传感器表面并作用55-65min,待饱和吸附后再进行红外光谱测定,根据ATZ红外特征吸收峰的强度与ATZ标准缓冲液中ATZ浓度的对数关系绘制工作曲线,之后根据绘制的工作曲线,对水环境中的ATZ进行检测。
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