[发明专利]一株可产褐藻胶裂解酶的勒克氏菌及其应用有效

专利信息
申请号: 202010122190.X 申请日: 2020-02-27
公开(公告)号: CN111100826B 公开(公告)日: 2021-11-02
发明(设计)人: 李莉莉;秦松;刘正一;宋宛霖 申请(专利权)人: 中国科学院烟台海岸带研究所
主分类号: C12N1/20 分类号: C12N1/20;C12N9/88;C12P19/00;C12P19/04;C12P19/12;C12R1/01
代理公司: 北京中济纬天专利代理有限公司 11429 代理人: 马国冉
地址: 264003 山*** 国省代码: 山东;37
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摘要:
搜索关键词: 一株可产 褐藻 裂解 勒克氏菌 及其 应用
【权利要求书】:

1.一株可产褐藻胶裂解酶的勒克氏菌(Leclercia sp .),其特征在于,该勒克氏菌分离自从黄海处采摘的腐烂的马尾藻,其生长周期短、可产褐藻胶裂解酶,并且所产的褐藻胶裂解酶具有较高的酶活,该勒克氏菌已于2019年4月28日进行了菌种保藏,保藏地点为:中国典型培养物保藏中心,保藏编号为:CCTCC M 2019314。

2.权利要求1所述的保藏编号为CCTCC M 2019314的勒克氏菌(Leclercia sp .)在制备褐藻寡糖中的应用。

3.根据权利要求2所述的应用,其特征在于,利用权利要求1所述的保藏编号为CCTCC M2019314的勒克氏菌(Leclercia sp .)制备褐藻寡糖的方法具体如下:

步骤1:将权利要求1所述的保藏编号为CCTCC M 2019314的勒克氏菌(Leclercia sp.)活化后接数环于种子培养基中,震荡培养得到种子液,然后将种子液接入到发酵培养基中,震荡培养得到发酵液,其中:

种子培养基的配方为:葡萄糖5g/L,蛋白胨5g/L,酵母浸粉10g/L,海水配制;

发酵培养基的配方为:葡萄糖3g/L,海藻酸钠3g/L,蛋白胨3g/L,酵母浸粉6g/L,自来水配制;

步骤2:将发酵液于4℃离心,得到粗酶液;

步骤3:将粗酶液加入到褐藻胶溶液中进行酶解,得到酶解液;步骤4:分离纯化褐藻寡糖。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在步骤1中,保藏编号为CCTCC M 2019314的勒克氏菌(Leclercia sp .)在Alg平板培养基上进行活化,Alg培养基的配方为:海藻酸钠5g/L,硫酸铵5g/L,硫酸镁1g/L,磷酸氢二钾2g/L,硫酸亚铁0 .01g/L,琼脂20g/L,自来水配制。

5.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在步骤1中,进行种子培养和发酵培养时,培养温度均为30℃,摇床转速均为200rpm,培养时间均为28h。

6.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在步骤3中,褐藻胶溶液的浓度为3g/L,粗酶液与褐藻胶溶液的体积比为1:9。

7.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在步骤3中,酶解温度为:35℃。

8.根据权利要求3所述的应用,其特征在于,在步骤4中,分离纯化褐藻寡糖的步骤依次包括:陶瓷膜过滤-醇沉抽滤-旋转蒸发-超滤透析-离子交换-纳滤浓缩。

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