[发明专利]啤酒中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸的快速检测方法

权利要求书

1.啤酒中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸的快速检测方法，其特征在于，依次包括以下步骤：

步骤S1、前处理步骤：

步骤S11：称量2.0g试样于50mL聚丙烯离心管中，加入0.2mL 1mg/L的内标工作液后，加入25mL 0.1N盐酸溶液，振摇30分钟，4000rpm离心10min；

步骤S12：取步骤S11中0.5mL上清液于2mL塑料离心管中，加入0.5mL0.1N氢氧化钾溶液，涡旋1分钟；

步骤S13：在步骤S12中涡旋结束后，加入1mL去离子水，涡旋1分钟，13000rpm离心10分钟；

步骤S14：取步骤S13中0.1mL上清液于2mL塑料离心管中，加入0.1mL硼酸缓冲溶液，摇匀后加入0.2mL 9-芴基甲基三氯甲烷溶液，涡旋1分钟，静置2分钟，加入0.55mL去离子水，摇匀，50℃烘箱放置2小时；

步骤S15：取出离心管，冷却至室温，加入0.05mL浓盐酸，摇匀后13000rpm离心5分钟，过0.45 μ m 滤膜；

步骤S2、上机测试步骤：经过步骤S15后，进行上机测试；

所述步骤S2、上机测试步骤中，

色谱柱：Luna C-18 150x2.0mm，5μ m；

柱温：40℃；

进样体积：40μ L；

流动相A：0.5％乙酸铵水溶液，流动相B：100％乙腈；

所述步骤S2、上机测试步骤中液相梯度：

初始：流动相A：90％，流动相B：10％，流速：0.5mL/min；

6.5min：流动相A：10％，流动相B：90％，流速：0.5mL/min；

7.5min：流动相A：10％，流动相B：90％，流速：0.5mL/min；

7.6min：流动相A：90％，流动相B：10％，流速：0.5mL/min；

11min：流动相A：90％，流动相B：10％，流速：0.5mL/min；

所述步骤S2、上机测试步骤中质谱参数：

质谱仪：AB Sciex 5500；

电离模式：ESI Negative；

鞘流气压力：25psi；

辅助气体流量：9arb；

离子喷雾电压：-4500V；

毛细管温度：550℃；

辅助气体加热器温度：60℃。

2.如权利要求1所述的啤酒中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸的快速检测方法，其特征在于，所述步骤S2、上机测试步骤中离子对：

化合物1、草甘膦-FMOC：定量离子：390-168；定性离子：390-150；

化合物2、氨甲基膦酸-FMOC：定量离子：402-180；定性离子：402-206；

化合物3、草铵膦-FMOC：定量离子：332-110；定性离子：332-136；

化合物4、草甘膦内标-FMOC：定量离子：393-171；定性离子：393-198；

化合物5、氨甲基膦酸内标-FMOC：定量离子：334-112；定性离子：334-138。

3.如权利要求1所述的啤酒中草甘膦、草铵膦和氨甲基膦酸的快速检测方法，其特征在于，所述步骤S11中内标工作液为：草甘膦1,2-¹³C₂-¹⁵N和氨基甲基磷酸-¹³C¹⁵N的混合液。