[发明专利]一种高效检测饲料预混料中脂溶性维生素的方法

说明书

本发明涉及一种高效检测饲料预混料中脂溶性维生素的方法，包括以下步骤：前处理步骤：称取2g预混料于100mL容量瓶中，记录下样品质量，加入15mLDMSO二甲基亚砜后漩涡震荡，加入0.6g/100mL的维生素D20.5mL,并于500C超声提取30分钟，再用无水乙醇定容至刻度；上机跑样步骤：经过前处理步骤后的溶液经0.45um滤膜过滤后上机测试；其中，上机跑样的上机条件和仪器设置：色谱柱：LUNA色谱柱，250mmX4.6mmX5um；流速：1.0mL/min；柱温：室温；流动相：A：水，B：甲醇100％，C：三氯甲烷100％；进样体积：50uL；波长：280nm。本发明通过整合和优化方法差异，将预混料中维生素A，D3，E，K3的测试统一，通过一次前处理和一次上机能够将4种脂溶性维生素全部检测出。

技术领域

本发明涉及检测相关技术领域，尤其涉及一种高效检测饲料预混料中脂溶性维生素的方法。

背景技术

预混料(Premix)全称预混合饲料，是由多种添加剂原料与载体或稀释剂搅拌均匀的混合物，常见的预混料有维生素添加剂，目的是有利于微量的原料均匀分散于大量的配合饲料中。在正常的贮存和使用条件下，预混料中微量元素、维生素等组分的物理和化学性质稳定，但当水分含量高时活温度较高时，其稳定性差，损失率大，所以在日常的储存中需要定期对预混料中的各类营养素进行成分分析以监控其稳定性。

预混料中的脂溶性维生素如维生素A，D3，E的热、光稳定性均较差，GB/T 17817第二法，GB/T 17812第二法，GB/T 17818第二法GB/T 18872分别对预混料中维生素A，E，D和K3进行了提取处理和仪器分析，方法中使用的甲醇毒性较大，维生素D3采用的外标法误差较大。

现有技术中，GB/T 17817饲料中维生素A的测定高效液相色谱法；GB/T 17812饲料中维生素E的测定高效液相色谱法；GB/T 17818饲料中维生素D3的测定高效液相色谱法；GB/T 18872饲料中维生素K3的测定高效液相色谱法。

现有技术中，预混料维生素A，E，D3的测定原理是使用甲醇溶液提取，注入C18反相色谱柱进行分离，分别于326nm，285nm和264nm波长下，外标法与标准溶液进行对比和定量。

预混料维生素K3的的测定原理是使用三氯甲烷和碳酸钠提取，并转换成游离甲萘醌，注入C18反相色谱柱进行分离，于251nm波长下，外标法与标准溶液进行对比和定量。

现有技术的缺点如下所述：

1、现有技术中需要进行2次前处理和2次上机提取步骤，维生素K3的提取步骤复杂，费时；

2、现有技术中使用的提取试剂甲醇和三氯甲烷均具有毒性，并且三氯甲烷属于易制毒，购买流程复杂；

3、维生素D3的稳定性差，甲醇提取液挥发性很强，现有技术使用的外标定量法不够准确。

有鉴于上述的缺陷，本设计人积极加以研究创新，以期创设一种高效检测饲料预混料中脂溶性维生素的方法，使其更具有产业上的利用价值。

发明内容

为解决上述技术问题，本发明的目的是提供一种高效检测饲料预混料中脂溶性维生素的方法，本方法是一种全新的对预混料中维生素A，E，D3和K3进行快速准确分析的方法，可以通过一次前处理方式和一次上机跑样，快速准确的同时分析预混料中四种维生素的含量。

为实现上述目的，本发明采用如下技术方案：

一种高效检测饲料预混料中脂溶性维生素的方法，包括以下步骤：

前处理步骤：称取2g预混料于100mL容量瓶中，记录下样品质量，加入15mLDMSO二甲基亚砜后漩涡震荡，加入0.6g/100mL的维生素D20.5mL,并于500C超声提取30分钟，再用无水乙醇定容至刻度；