[发明专利]一种花叶矮蒲苇组织培养的培养方法

权利要求书

1.一种花叶矮蒲苇组织培养的培养方法，其特征在于，包括以下步骤：

（1）外植体的选择和消毒灭菌：选取生长健壮且无病虫的花叶矮蒲苇植株，选取新长出的嫩芽为外植体，去除外植体多余茎段和包裹的叶片，并洗去附着的碎叶和杂质，将处理完的外植体放入混有1~2滴吐温的质量分数为0.08%~0.12%的升汞溶液中，消毒7~9分钟，取出用无菌水冲洗4~6次，切除褐变部分，将外植体切割成2~3cm小段，接种到初代培养基上培养5~7天，所述初代培养基为含有蔗糖和琼脂粉的1/2MS培养基；

（2）芽诱导培养：从初代培养基中选取无污染外植体，将其接种到诱导培养基上，7~15天形成不定芽，再培养15~25天后不定芽增高到2~3cm，所述诱导培养基为含有0.5~1.5mg/L的6-BA、0.4~0.6mg/L的2， 4-D、蔗糖和琼脂的MS培养基；

（3）增殖培养：将步骤（2）中经芽诱导培养后的不定芽接种到增殖培养基上，所述增殖培养基为含有高浓度激素6-BA或低浓度激素6-BA、蔗糖和琼脂的MS培养基，整个增殖培养过程中高浓度激素6-BA2.0~3.0mg/L、低浓度激素6-BA0.2~0.4mg/L交替使用，扩繁增殖系数控制在8以上；

（4）生根培养：将增殖培养后的苗分成单株接入生根培养基中继续培养，所述培养基为含有0~1.0 mg/L的IBA、蔗糖和琼脂的1/4MS培养基，生根培养时7~15天苗长出根原基，15~25天根长3~4cm，生根率95%~100%；

（5）炼苗：将在生根培养基上培养25~30天的苗取出，去除根部，洗去培养基，置于多菌灵溶液浸泡2~3分钟，洗净栽种在泥炭和珍珠岩的混合基质中，栽种完成放入大棚内，保持温度在15~25℃，湿度在65%以上。

2.根据权利要求1所述的花叶矮蒲苇组织培养的培养方法，其特征在于，所述步骤（2）-（4）中，所述腋芽诱导培养基、增殖培养基和生根培养基中蔗糖20~30g/L、琼脂粉5~7g/L，培养基的pH为5.8~6.2。

3.根据权利要求1所述的花叶矮蒲苇组织培养的培养方法，其特征在于，所述步骤（2）-（4）中，芽诱导、增殖、生根培养过程中，培养环境温度24~26℃，光照1500~2500lx。

4.根据权利要求1所述的花叶矮蒲苇组织培养的培养方法，其特征在于，所述步骤（5）中炼苗时混合基质泥炭和珍珠岩的比例为3:0.5~2。

5.根据权利要求1所述的花叶矮蒲苇组织培养的培养方法，其特征在于，所述步骤（5）中炼苗时，移栽完成后从早8点至晚6点每半小时浇水10~15秒，保持苗木土壤湿润，持续6~8天，一周后撤去遮阳网，每天浇水一次，持续8~12分钟，通风一次。