[发明专利]一种包虫病新抗原Cystatin蛋白

说明书

本发明公开了一种包虫病新抗原Cystatin蛋白。本发明提供的Cystatin蛋白其氨基酸序列中含有如下中的全部或部分：SEQ ID No.1的第1‑25位、第32‑56位、第64‑84位、第89‑95位、第141‑147位、第155‑168位。本发明通过GeLS‑MS/MS技术，找到了一个包虫病新抗原Cystatin蛋白，可以用来制作ELISA试剂盒并用于临床检测人源包虫病。本发明检测14例术后包虫病人血浆和6例正常西藏人血浆，阳性检出率为93％，阴性检出率为100％。本发明扩充了包虫抗原库，对诊断人源包虫病有一定的贡献。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及一种包虫病新抗原Cystatin蛋白。

背景技术

包虫病又名棘球蚴病，是一种人畜共患病，在中国中西部地区(西藏、青海、四川、新疆等地)感染尤其严重。人源包虫病主要分为囊型包虫病和泡型包虫病。影像学检测是最直观最常用的包虫病诊断方法，但是由于包虫病的潜伏期较长，并且只有在包虫病形成的包囊大到一定程度时才能够通过影像学检测到，所以血清学检测是影像学诊断包虫病的重要辅助手段之一。

迄今为止，已经描述了几种用于包虫病实验室诊断的方法，包括抗体，抗原和细胞因子的检测。其中，抗体检测的发展主要依赖于包虫抗原种类的发展。但是不论天然纯化抗原还是重组纯化抗原，均在特异性和/或敏感性方面有一定的不足。更为重要的是人源包虫病因涉及到取样困难、分离包虫蛋白困难等因素，一直没有出现更多的可用于血清学检测的抗原。具体而言，现有技术存在如下不足：1)从包虫病人术后分离的包虫囊中提取包虫蛋白并鉴定，本身是一个技术难点。如果鉴定到的包虫蛋白本身种类就很少，想从中选取可能作为包虫抗原的蛋白将更加困难。2)单一抗原种类少。目前最广泛应用的包虫病诊断抗原是AntigenB和Antigen5，许多研究表明这两种抗原在血清检测时会产生一定的假阳性或假阴性。3)商品化包虫抗原是天然纯化抗原，分离纯化自细粒棘球蚴破碎后的可溶性抗原片段，是一种包含多种包虫蛋白的混合物。混合的蛋白越多越容易在血清检测时产生更多假阴性或假阳性的结果。

发明内容

为了克服现有技术的不足，本发明旨在寻找更多可以用来诊断包虫病的抗原，扩充包虫抗原数据库，使这些抗原或单一或组合都有可能提升实验室诊断包虫病的特异性和灵敏性。进而，产生从包虫病人术后分离的包虫囊中提取更多包虫蛋白并鉴定的成熟实验流程。

第一方面，本发明的目的是提供一种蛋白质。

本发明所提供的蛋白质，其氨基酸序列中含有如下中的全部或部分：

(1)SEQ ID No.1的第1-25位；

(2)SEQ ID No.1的第32-56位；

(3)SEQ ID No.1的第64-84位；

(4)SEQ ID No.1的第89-95位；

(5)SEQ ID No.1的第141-147位；

(6)SEQ ID No.1的第155-168位。

进一步地，所述蛋白质可为如下任一：

(A1)氨基酸序列为SEQ ID No.1的蛋白质；

(A2)将SEQ ID No.1所示的氨基酸序列经过一个或几个氨基酸残基的取代和/或缺失和/或添加且具有相同功能的蛋白质；

(A3)与(A1)-(A2)中任一所限定的氨基酸序列具有99％以上、95％以上、90％以上、85％以上或者80％以上同源性且具有相同功能的蛋白质；

(A4)在(A1)-(A3)中任一所限定的蛋白质的N端和/或C端连接标签后得到的融合蛋白。