[发明专利]肺炎支原体抗体IgG的免疫检测试剂盒、其制备方法及使用方法有效
| 申请号: | 202010064149.1 | 申请日: | 2020-01-20 |
| 公开(公告)号: | CN111239411B | 公开(公告)日: | 2023-09-12 |
| 发明(设计)人: | 张艺;胡志刚;周彬;郭明明;杨润琳;谢敏浩;张珏;范俊 | 申请(专利权)人: | 江苏省原子医学研究所 |
| 主分类号: | G01N33/68 | 分类号: | G01N33/68;G01N33/58;G01N33/569;G01N33/558 |
| 代理公司: | 南京灿烂知识产权代理有限公司 32356 | 代理人: | 朱妃 |
| 地址: | 214063 江*** | 国省代码: | 江苏;32 |
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| 摘要: | |||
| 搜索关键词: | 肺炎 支原体 抗体 igg 免疫 检测 试剂盒 制备 方法 使用方法 | ||
1.一种荧光免疫层析试纸条在制备肺炎支原体抗体IgG的免疫检测试剂盒中的应用,其特征在于:采用肺炎支原体抗体IgG的免疫检测试剂盒,所述免疫检测试剂盒包括荧光免疫层析试纸条、微球溶液、样品稀释液;
所述荧光免疫层析试纸条,包括吸水纸、层析膜、样品垫、支持底板,所述层析膜上设置检测线和质控线,所述检测线上涂有MP抗原;
所述微球溶液中,其微球为偶联有抗人IgG抗体的微球,微球的浓度为5~50μg/mL;抗人IgG抗体与微球偶联反应时的质量比为1:10~100;
所述样品稀释液含有0.1~1.0%BSA和0.1~2.0%S9;
所述微球,其为聚苯乙烯材质;所述微球,其直径为100~500nm;
所述检测线,其MP抗原的含量为5~150ng/mm2;
将样品滴加在样品垫中孵育15min;向样品垫加入微球溶液,孵育5min;进行荧光检测。
2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述微球,其荧光物质包括异硫氰酸荧光素或镧系元素;所述层析膜包括硝酸纤维素膜。
3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述免疫检测试剂盒,其制备方法包括制备微球溶液,所述制备微球溶液的制备方法为:
活化微球:将碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺加入微球进行活化;
偶联:加入2-(N-吗啉)乙磺酸溶液清洗后,再加入抗人IgG抗体,按抗体与微球的质量比为1:10~100进行偶联;
封闭:加入封闭液进行封闭;
洗涤:去除未反应物,获得偶联微球;
稀释:将偶联得到的微球稀释至10~50μg/mL。
4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述2-(N-吗啉)乙磺酸溶液,其pH为4.5;所述活化,其活化液含有碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺;所述封闭液,含有10%牛血清白蛋白;所述洗涤,其洗涤液为含有Tween-20的Tris-HCl缓冲液。
5.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述样品,其在滴加到样品垫之前先进行稀释,稀释倍数为50~1000倍。
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