[发明专利]肺炎支原体抗体IgG的免疫检测试剂盒、其制备方法及使用方法有效

专利信息
申请号: 202010064149.1 申请日: 2020-01-20
公开(公告)号: CN111239411B 公开(公告)日: 2023-09-12
发明(设计)人: 张艺;胡志刚;周彬;郭明明;杨润琳;谢敏浩;张珏;范俊 申请(专利权)人: 江苏省原子医学研究所
主分类号: G01N33/68 分类号: G01N33/68;G01N33/58;G01N33/569;G01N33/558
代理公司: 南京灿烂知识产权代理有限公司 32356 代理人: 朱妃
地址: 214063 江*** 国省代码: 江苏;32
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摘要:
搜索关键词: 肺炎 支原体 抗体 igg 免疫 检测 试剂盒 制备 方法 使用方法
【权利要求书】:

1.一种荧光免疫层析试纸条在制备肺炎支原体抗体IgG的免疫检测试剂盒中的应用,其特征在于:采用肺炎支原体抗体IgG的免疫检测试剂盒,所述免疫检测试剂盒包括荧光免疫层析试纸条、微球溶液、样品稀释液;

所述荧光免疫层析试纸条,包括吸水纸、层析膜、样品垫、支持底板,所述层析膜上设置检测线和质控线,所述检测线上涂有MP抗原;

所述微球溶液中,其微球为偶联有抗人IgG抗体的微球,微球的浓度为5~50μg/mL;抗人IgG抗体与微球偶联反应时的质量比为1:10~100;

所述样品稀释液含有0.1~1.0%BSA和0.1~2.0%S9;

所述微球,其为聚苯乙烯材质;所述微球,其直径为100~500nm;

所述检测线,其MP抗原的含量为5~150ng/mm2

将样品滴加在样品垫中孵育15min;向样品垫加入微球溶液,孵育5min;进行荧光检测。

2.根据权利要求1所述的应用,其特征在于:所述微球,其荧光物质包括异硫氰酸荧光素或镧系元素;所述层析膜包括硝酸纤维素膜。

3.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述免疫检测试剂盒,其制备方法包括制备微球溶液,所述制备微球溶液的制备方法为:

活化微球:将碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺加入微球进行活化;

偶联:加入2-(N-吗啉)乙磺酸溶液清洗后,再加入抗人IgG抗体,按抗体与微球的质量比为1:10~100进行偶联;

封闭:加入封闭液进行封闭;

洗涤:去除未反应物,获得偶联微球;

稀释:将偶联得到的微球稀释至10~50μg/mL。

4.根据权利要求3所述的应用,其特征在于:所述2-(N-吗啉)乙磺酸溶液,其pH为4.5;所述活化,其活化液含有碳二亚胺和N-羟基琥珀酰亚胺;所述封闭液,含有10%牛血清白蛋白;所述洗涤,其洗涤液为含有Tween-20的Tris-HCl缓冲液。

5.根据权利要求1或2所述的应用,其特征在于:所述样品,其在滴加到样品垫之前先进行稀释,稀释倍数为50~1000倍。

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