[发明专利]一种改进的多抗霉素生物效价测定培养基及其制备方法

权利要求书

1.一种改进的多抗霉素生物效价测定培养基，其特征在于，由上层培养基和下层培养基组成，其中，上层培养基由以下配方组成：蔗糖0.5%-3%，L-天冬酰胺0.01%-0.2%，磷酸二氢钾0.01%-0.2%，西红柿汁0.5%-5%，琼脂10%-20%，余量为纯水；下层培养基由以下配方组成：蔗糖0.5%-3%，L-天冬酰胺0.01%-0.2%，磷酸二氢钾0.01%-0.2%，琼脂10%-20%，余量为纯水。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，上层培养基由以下配方组成：蔗糖1%，L-天冬酰胺0.05%，磷酸二氢钾0.05%，西红柿汁1.6%，琼脂1.5%，余量为纯水；下层培养基由以下配方组成：蔗糖1%，L-天冬酰胺0.05%，磷酸二氢钾0.05%，琼脂1.8%，余量为纯水。

3.根据权利要求1-2中任一项所述的培养基的制备方法，其特征在于，按比例称取配方中的各个组分，放置室温后调节其pH为5.9-6.3，再分别分装得到上层培养基和下层培养基，然后通过灭菌得到。

4.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的西红柿汁在测定多抗霉素效价时倾倒上层培养基前且培养基温度降为60℃时添加，并在紫外灯照射下灭菌30-45 min。

5.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的西红柿汁为去皮且经过煮沸的西红柿汁，占上层培养基的质量比例为1.0-3.0%。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，西红柿汁占上层培养基的质量比例为1.6%。

7.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的上层培养基蔗糖的质量占比1%，L-天冬酰胺占比0.05%，磷酸二氢钾占比0.05%，琼脂占比15%，余量为纯水；所述的下层培养基蔗糖的质量占比1%，L-天冬酰胺占比0.05%，磷酸二氢钾占比0.05%，琼脂占比18%，余量为纯水。

8.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，放置室温后调节其pH为6.1。

9.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的灭菌为在110-130℃下灭菌20-30 min。

10.根据权利要求9所述的制备方法，其特征在于，所述的灭菌为在121℃下灭菌30min。

11.根据权利要求3所述的制备方法，其特征在于，所述的制备方法包括以下步骤：

西红柿汁的制备：取250 g西红柿，纯水清洗干净，去掉表皮，切碎加500 mL纯水煮沸15-20 min，用4-6层纱布过滤，得到西红柿汁，放至室温后密封，4℃冰箱保存备用，使用前应在紫外灯照射下灭菌30-45 min；

2）上层培养基的制备：蔗糖1%，L-天冬酰胺0.05%，磷酸二氢钾0.05%，西红柿汁1.6%，琼脂15%，余量为纯水，加热煮沸15-30 min至琼脂完全溶解，用4-6层纱布过滤，放置室温后调节其pH在5.9-6.3之间，分装得到上层培养基；

其中西红柿汁在测定生物效价倾倒上层培养基前且培养基温度降为60℃时添加，避免西红柿汁的营养被多次高温破坏；

3）下层培养基的制备：蔗糖1%，L-天冬酰胺0.05%，磷酸二氢钾0.05%，琼脂18%，余量为纯水，加热煮沸15-30 min至琼脂完全溶解，用4-6层纱布过滤，放置室温后调节其pH在5.9-6.3之间，分装得到下层培养基；

4）将分装好的上、下层培养基在110-130℃下灭菌20-30 min。