[发明专利]抗血小板抗体生物薄片的制作方法

权利要求书

1.一种抗血小板抗体生物薄片的制作方法，其特征在于生物薄片上形成有凹槽的反应区包被有血小板和Hep-2细胞两种组织抗原，应用磷酸盐缓冲液洗涤血小板和Hep-2细胞混悬液5次，进行15000G离心10min，弃去上清液,继续用10ml PBS-T缓冲液5％(V/V)TritonX-100PBS混悬,用PBS调整混合细胞数至100个/μl，点片到含有多聚赖氨酸的玻璃或者聚苯乙烯薄片上,冷风吹干后,密封,2～8℃低温保存。

2.根据权利要求1所述的一种抗血小板抗体生物薄片的制作方法，其特征在于检测方法为：待检血清样本用PBS吐温缓冲液1:10稀释，将11.1μl血清样本加入到100μlPBS吐温缓冲液中并充分混匀；加样：将25μl稀释后的血清样本加至生物薄片反应区后，37℃温育30分钟，应避免产生气泡；冲洗：用盛于烧杯内的PBS吐温缓冲液冲洗载片1秒钟，然后立即将生物载片浸入装有PBS吐温缓冲液的洗杯中，浸泡至少5分钟；加样：将25μL FITC标记的荧光二抗加至生物薄片的反应区上后，开始温育37℃温育30分钟，应避免产生气泡；冲洗：用烧杯内的PBS吐温缓冲液冲洗载片1秒钟，然后立即将生物载片浸入装有PBS吐温缓冲液的洗杯中，浸泡至少5分钟；封片：滴加25μL甘油/PBS至生物薄片反应区上，盖上盖玻片。

3.根据权利要求1所述的一种抗血小板抗体生物薄片的制作方法，其特征在于结果判断：通过血小板和Hep-2细胞两种组织抗原荧光强度进行比较，当血小板荧光强度高于Hep-2细胞，为抗血小板抗体阳性，当Hep-2细胞和抗血小板抗体同时出现阳性时，为抗核抗体交叉反应造成的假阳性。