[发明专利]一种偶联有蛋白的微球冻干制剂及其制备方法、保存方式

说明书

本发明公开了一种偶联有蛋白的微球冻干制剂及其制备方法、保存方式，微球冻干制剂包括冻干保护剂和偶联有蛋白的微球；冻干保护剂包括溶剂和溶质，溶剂为0.1～0.2mol/L的磷酸盐缓冲液；以溶剂的体积计，溶质为：动物血清：1～10％(v/v)；海藻糖：1～10％(w/v)；聚乙烯吡咯烷酮：0.2～5％(w/v)；葡聚糖：0.2～5％(w/v)；甘露醇：3％～10％(w/v)；Proclin300：0.01～0.1％(v/v)；冻干保护剂的pH值为7.4±0.5；偶联有蛋白的微球冻干制剂由冻干保护剂和偶联有蛋白的微球混合后冻干获得。采用本发明的冻干制剂，能够显著提高偶联有蛋白的微球的稳定性。

技术领域

本发明属于生物技术领域，具体涉及一种偶联有蛋白的微球冻干制剂及其制备方法、保存方式。

背景技术

微球的主要化学成分为聚苯乙烯，表面有一层功能基层(如氨基、羧基、羟基等)，可结合不同的配体(抗体、抗原、寡核苷酸链等)，从而成为具有靶向结合目标分子的微球。

将不同编码类别的微球分别偶联不同的配体，再依次加入待测样品及报告分子，不同微球上的配体与目标分子进行特异性结合，报告分子再与目标分子特异性结合，即构成了一个液相蛋白芯片系统，该系统可对同一样品中的多种目标分子进行同时检测。

微球的常规保存方法是液态低温保存，液态低温保存的方法存在有效期短、稳定性差、蛋白易脱落等缺点，保存效果也不能令人满意，而且微球上的活性物质如抗体、抗原等蛋白的稳定性较差，最终容易影响微球类诊断试剂的有效期。此外，使用过程中发现，由于微球偶联的抗体、抗原不同，需要不同的保存液，保存效果也存在一定的差异。采用较低温的苛刻条件进行产品保存，增加了产品的运输成本，例如Thermo Fisher公司的LabScreen^TM产品为了保证微球等的稳定性，需要将产品以干冰形式运输，保存在-65℃以下的低温条件，待使用时，微球解冻后，在2～8℃下可储存3个月，并且不能再次冰冻。

现有技术中，为了保证抗体在长期的保存或者运输过程中活性的稳定，通常将其进行冻干处理，但是在微球或者偶联有配体的微球保存方面，却未有能够用于其冻干保存的保护试剂。

发明内容

本发明所要解决的技术问题是为了克服现有技术中偶联有蛋白的微球在液态保存中稳定性差、保质期短的缺陷，而提供一种偶联有蛋白的微球冻干制剂及其制备方法、保存方式。

本发明通过以下技术方案来解决上述技术问题：

本发明提供了一种偶联有蛋白的微球冻干制剂，所述微球冻干制剂包括冻干保护剂和偶联有蛋白的微球；

所述冻干保护剂包括溶剂和溶质，所述溶剂为0.1～0.2mol/L的磷酸盐缓冲液；以溶剂的体积计，所述溶质为：动物血清：1～10％(v/v)；海藻糖：1～10％(w/v)；聚乙烯吡咯烷酮(或称为PVP)：0.2～5％(w/v)；葡聚糖(或称为右旋糖酐)：0.2～5％(w/v)；甘露醇：3％～10％(w/v)；Proclin300：0.01～0.1％(v/v)；所述冻干保护剂的pH值为7.4±0.5；其中，所述v/v是指占所述溶剂的体积百分比浓度；所述w/v是指所述溶质占所述溶剂的质量/体积百分比浓度，单位为g/ml；

所述偶联有蛋白的微球冻干制剂由所述冻干保护剂和所述偶联有蛋白的微球混合后冻干获得。

本发明中，所述磷酸盐缓冲液一般可替换为同浓度的柠檬酸盐缓冲液，tris缓冲液。

本发明中，所述磷酸盐缓冲液的种类可为本领域常规，例如可为不含有氯化钾的磷酸盐缓冲液或者只含有磷酸氢二钾和磷酸二氢钠的缓冲液。

本发明中，当所述磷酸盐缓冲液含有磷酸二氢钠时，所述磷酸二氢钠可为十二水合磷酸二氢钠、二水合磷酸二氢钠或无水磷酸二氢钠。当所述磷酸盐缓冲液含有磷酸氢二钠时，所述磷酸氢二钠可为十二水合磷酸氢二钠、二水合磷酸氢二钠或无水磷酸氢二钠。