[发明专利]热葡萄糖苷酶地芽孢杆菌工程菌及其构建方法及应用

权利要求书

1.热葡萄糖苷酶地芽孢杆菌(Geobacillus thermoglucosidasius)工程菌GT-01S，其特征在于，工程菌GT-01S是通过基因工程技术在热葡萄糖苷酶地芽孢杆菌(Geobacillusthermoglucosidasius)DSM 2542的ribC基因上引入点突变，使其编码蛋白的第199位氨基酸残基由G变为D，将改造后的菌株命名为GT-01，然后将携带有表达热脱氮地芽孢杆菌(Geobacillus thermodenitrificans)核黄素合成基因簇的表达载体导入菌株GT-01中构建得到的；其中，ribC基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:1所示。

2.热葡萄糖苷酶地芽孢杆菌工程菌GT-02S，其特征在于，工程菌GT-02S是通过基因工程技术敲除菌株GT-01中的purA基因，将改造后的菌株命名为GT-02，然后将携带有表达热脱氮地芽孢杆菌核黄素合成基因簇的表达载体导入菌株GT-02中构建得到的；其中，purA基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:2所示；

菌株GT-01的定义同权利要求1中所述。

3.热葡萄糖苷酶地芽孢杆菌工程菌GT-03S，其特征在于，工程菌GT-03S是通过基因工程技术敲除菌株GT-02中的purR基因，将改造后的菌株命名为GT-03，然后将携带有表达热脱氮地芽孢杆菌核黄素合成基因簇的表达载体导入菌株GT-03中构建得到的；其中，purR基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:3所示；

菌株GT-02的定义同权利要求2中所述。

4.热葡萄糖苷酶地芽孢杆菌工程菌GT-04S，其特征在于，工程菌GT-04S是通过基因工程技术敲除菌株GT-03中的ccpN基因，将改造后的菌株命名为GT-04，然后将携带有表达热脱氮地芽孢杆菌核黄素合成基因簇的表达载体导入菌株GT-04中构建得到的；其中，ccpN基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:4所示；

菌株GT-03的定义同权利要求3中所述。

5.热葡萄糖苷酶地芽孢杆菌工程菌GT-05S，其特征在于，工程菌GT-05S是通过基因工程技术敲除菌株GT-04中的ldh基因，将改造后的菌株命名为GT-05，然后将携带有表达热脱氮地芽孢杆菌核黄素合成基因簇的表达载体导入菌株GT-05中构建得到的；其中，ldh基因的核苷酸序列如SEQ ID NO:5所示；

菌株GT-04的定义同权利要求4中所述。

6.根据权利要求1-5任一项所述的工程菌，其特征在于，携带有表达热脱氮地芽孢杆菌核黄素合成基因簇的表达载体为pUCG3.8-R2；

所述热葡萄糖苷酶地芽孢杆菌为DSM 2542。