[发明专利]用于红细胞的单个细胞标记的试剂盒及其检测方法

权利要求书

1.用于质谱流式细胞术中细胞(例如红细胞或白细胞)标记的染色液，其含有锇酸，在所述染色液的工作浓度下，所述锇酸的浓度为10^-5％～10^-4％(w/v)，优选为3×10^-5％～7×10^-5％(w/v)，更优选为5×10^-5％～7×10^-5％(w/v)。

2.试剂盒，包含权利要求1所述的染色液，其还进一步包含：金属标记抗体，优选为细胞特异性金属标记抗体。

3.根据权利要求1或2所述的试剂盒，其中：当所述细胞为红细胞时，所述试剂盒还包含红细胞定型液，所述红细胞定型液含有浓度为2％～5％(v/v)，优选为2％～3％(v/v)的戊二醛。

4.根据权利要求2～3中任一项所述的试剂盒，其中，所述细胞特异性金属标记抗体为镧系元素标记抗体(优选为抗小鼠Ter119-镧系元素标记抗体、抗人CD235ab-镧系元素标记抗体、抗小鼠CD45-镧系元素标记抗体或抗人CD45-镧系元素标记抗体中的一种或多种)，任选地，在检测时，共同使用的镧系元素标记抗体中的镧系元素彼此不相同。

5.根据权利要求4所述的试剂盒，其中，所述镧系元素标记抗体中的镧系元素选自La(镧)，Ce(铈)，Pr(镨)，Nd(钕)，Pm(钷)，Sm(钐)，Eu(铕)，Gd(钆)，Tb(铽)，Dy(镝)，Ho(钬)，Er(铒)，Tm(铥)，Yb(镱)，Lu(镥)，钪(Sc)，钇(Y)，优选为Sm(钐)、Pr(镨)。

6.根据权利要求2～5中任一项所述的试剂盒，其进一步包含染色用缓冲液，所述染色用缓冲液为包含0.5％～1％(w/v)的封闭蛋白(如牛血清白蛋白)且不含钙镁离子的缓冲液(优选为pH范围为7.2～7.4的磷酸盐缓冲液，更优选为PBS)。

7.根据权利要求2～6所述的试剂盒，其进一步包含细胞洗液，所述细胞洗液(优选为pH范围为7.2～7.4的磷酸盐缓冲液，更优选为PBS)中不含钙镁离子，优选地，不含该镁离子的磷酸盐缓冲液浓度为0.0067M。

8.权利要求2～7中任一项所述的试剂盒在单个细胞的检测中的应用，其中，优选被检测的细胞中包含红细胞。

9.浓度2％～5％(v/v)的戊二醛溶液在长期保存红细胞中的应用。

10.一种单个细胞元素检测的方法，包括以下步骤：

利用浓度为2％～5％(v/v)，优选为2％～3％(v/v)的戊二醛溶液处理细胞；

使用锇酸的浓度为10^-5～10^-4％(w/v)，优选为3×10^-5～7×10^-5％(w/v)，更优选为5×10^-5～7×10^-5％(w/v)的染色液标记细胞(其中，优选细胞的浓度为2×10⁶～4×10⁶个/ml)；

使用金属标记抗体(优选为细胞特异性金属标记抗体)标记细胞。

11.根据权利要求10所述的方法，其进一步包括下述步骤中的一种或多种：

将所述金属标记抗体溶解于权利要求6中定义的染色缓冲液中；

使用权利要求6中定义的染色缓冲液洗涤细胞；

使用权利要求7中定义的细胞洗液洗涤细胞。