[发明专利]鉴别非洲猪瘟感染与免疫的荧光PCR检测试剂盒

权利要求书

1.一种用于定量检测非洲猪瘟病毒感染或用于鉴别非洲猪瘟感染与非洲猪瘟疫苗免疫的引物探针组，其特征在于所述引物探针组包括：

（1）针对P72基因的如下引物探针：

P72基因正向引物：5’-ACATTTCCGTAACTGCTCATGG-3’（SEQ ID NO：7）；

P72基因反向引物：5’-CTCTTGCTCTGGATACGTTAATATG-3’（SEQ ID NO：8）；

P72基因探针：

5’-Fluorophore-CCACTGGGTTGGTATTCCTCCCGTG-Quencher -3’（SEQ ID NO：9）

（2）针对CD2v基因的如下引物探针：

CD2v基因正向引物：5’-ATTTCCCTTACCTAAACCGTGTCC-3’（SEQ ID NO：1）；

CD2v基因反向引物：5’-AGTAGCGGGATACTAGGTAGTGG-3’（SEQ ID NO：2）；

CD2v基因探针：

5’-Fluorophore-CCACCCAAACCATGTCCGCCACCC-Quencher-3’（SEQ ID NO：3）；以及

（3）针对eGFP基因的如下引物探针：

eGFP基因正向引物：5’-CAGGAGCGCACCATCTTC-3’（SEQ ID NO：4）；

eGFP基因反向引物：5’-AAGTCGATGCCCTTCAGC-3’（SEQ ID NO：5）；

eGFP基因探针：

5’-Fluorophore-CAAGGACGACGGCAACTACAAGACC-Quencher-3’（SEQ ID NO：6），

其中，所述P72探针的5’端标记报告荧光染料Fluorophore为FAM，3’端标记荧光淬灭基团Quencher为Eclipse；所述CD2v探针的5’端标记报告荧光染料Fluorophore为HEX，3’端标记荧光淬灭基团Quencher为BHQ1，Eclipse或TAMRA；所述eGFP基因 探针的5’端标记报告荧光染料Fluorophore为cy5，3’端标记荧光淬灭基团Quencher为BHQ2，Eclipse或TAMRA。

2.一种用于检测非洲猪瘟感染或用于鉴别非洲猪瘟感染与非洲猪瘟疫苗免疫的PCR试剂盒，其特征在于所述试剂盒包含权利要求1的引物探针组。

3.根据权利要求2的试剂盒，其特征在于在所述PCR反应体系中P72基因正向引物的浓度为0.4~0.8μM，P72基因反向引物的浓度为0.4~0.8μM，P72基因探针的浓度为0.08~0.8μM；和/或在所述PCR反应体系中CD2v基因正向引物的浓度为0.4~0.8μM，CD2v基因反向引物的浓度为0.4~0.8μM，CD2v基因探针的浓度为0.08~0.8μM；和/或在所述PCR反应体系中eGFP基因正向引物的浓度为0.4~0.8μM，eGFP基因反向引物的浓度为0.4~0.8μM，eGFP基因探针的浓度为0.08~0.8μM。

4.权利要求1的引物探针组在制备用于检测非洲猪瘟感染的试剂盒中的应用。

5.权利要求1的引物探针组在制备用于鉴别非洲猪瘟感染与非洲猪瘟疫苗免疫的试剂盒中的应用。