[发明专利]分离装置及使用该分离装置对分离对象物进行分离的方法

说明书

一种分离装置及分离方法，其用于从通过使用了微细的支架材料的粘附性细胞的悬浮培养得到的悬浮液分离该悬浮液中包含的固态分离对象物。该分离装置具有具备第1室和第2室的分离室，第1室与第2室被分离用网状结构分隔开。分离用网状结构具有以抑制分离对象物通过的方式预先确定的大小的网眼，以悬浮液中的液体通过前述网眼时的该液体的行进方向具有垂直向上的方向成分的方式在分离室中配置了分离用网状结构。

技术领域

本发明涉及用于将通过使用微细的支架材料进行的粘附性细胞的悬浮培养得到的悬浮液中的分离对象物从液体中分离的分离装置、及其用途。

背景技术

近年来，报道了下述技术：使提高了向水中的分散性的、由多糖类(壳多糖(chitin)等非水溶性多糖类)形成的纳米纤维分散于液体培养基中而作为微细的支架材料，将动植物细胞及/或组织以悬浮状态进行培养(专利文献1)。

通过使用前述的纳米纤维作为支架材料，将间充质干细胞、脂肪祖细胞等粘附性细胞以粘附于该纳米纤维的状态进行培养，从而能够将该细胞在静置的状态下悬浮培养。该纳米纤维在液体培养基中是不溶性的，具有在该液体培养基中悬浮、使细胞粘附的活性。因此，在使用了该纳米纤维的悬浮培养中，粘附于该纳米纤维的间充质干细胞、脂肪祖细胞显示出长期的存活性，在维持其性状的同时在该纳米纤维上良好地增殖。

现有技术文献

专利文献

专利文献1：国际公开第2015/111686号

发明内容

发明所要解决的课题

前述的纳米纤维是生物降解性的，可以利用分解构成该纳米纤维的多糖类(例如壳多糖)的酶(多糖类分解酶)来进行分解。本申请的发明人着眼于此点，发现若在液体培养基中对培养细胞所粘附的纳米纤维应用前述多糖类分解酶，则能够在不使用蛋白质分解酶、即抑制对培养细胞的损伤的同时，分离培养细胞。

然而，使用多糖类分解酶来分离在粘附于前述纳米纤维上的状态下生长的培养细胞时，需要利用该多糖类分解酶将前述纳米纤维充分分解、使残留的培养细胞沉降并进行回收这样的工艺。已获知在这样的回收工艺中会产生下述额外的问题：伴随着培养大量的细胞，多糖类分解酶也被大量需要；未分解的多糖类残留，混杂在回收的培养细胞中。另外还获知，对于利用培养细胞在液体培养基中因自重而沉降这一点的工艺而言，回收需要较长时间，因此不理想；对于利用离心分离的工艺而言，培养细胞受到损伤，因此不理想。

另一方面，在细胞培养中，有时将由经培养的细胞生产的体液因子(培养细胞分泌至液体培养基中的物质、通过溶解培养细胞而得到的物质等)作为应回收的对象物。例如，对在悬浮于液体培养基中的微细支架材料上附着的细胞分泌至液体培养基中的物质进行回收的情况下，需要将(支架材料和在其上附着的培养细胞)、与(液体培养基)分离并回收液体培养基。另外，对培养细胞中包含的物质进行回收的情况下，需要利用试剂将培养细胞溶解在液体培养基中，将(支架材料)与(溶解了培养细胞的液体培养基)分离并回收该(溶解了培养细胞的液体培养基)。

如前述那样液体为通过对象物的情况下，作为不利用离心分离的简单的回收方法，可考虑使用多孔性的过滤器、仅使液体通过并进行回收的方法。然而，已获知在使用多孔性的过滤器的方法中，该过滤器由于(支架材料和在其上附着的培养细胞)或(支架材料)而快速堵塞，因此需要频繁地更换过滤器，难以高效地回收液体培养基本身。

本发明的目的在于，消除前述的问题，提供在使用了微细的支架材料的粘附性细胞的悬浮培养中能够将分离对象物更高效地分离而得到通过对象物的分离装置、及使用该分离装置的分离对象物的分离方法。

用于解决课题的手段

本发明的主要构成如下所述。

〔1〕一种分离装置，其用于从通过使用了微细的支架材料的粘附性细胞的悬浮培养得到的悬浮液分离该悬浮液中包含的固态分离对象物，