[发明专利]涉及基于适体的可逆细胞选择的组合物和方法

权利要求书

1.一种用于从包含多种细胞类型的生物样品中分离感兴趣的细胞的方法，所述方法包括：

a.在允许形成与适体结合的细胞的条件下，使所述生物样品与适体接触，所述适体特异性结合对所述感兴趣的细胞具有特异性的细胞表面标志物；

b.将所述与适体结合的细胞与未与适体结合的细胞分开；以及

c.通过破坏所述适体与所述细胞表面标志物的结合来回收所述感兴趣的细胞，

从而从所述生物样品中分离所述感兴趣的细胞。

2.如权利要求1所述的方法，其中，所述感兴趣的细胞是活的。

3.如权利要求1或2所述的方法，其中，所述感兴趣的细胞是白细胞。

4.如权利要求1-3中任一项所述的方法，其中，所述感兴趣的细胞是淋巴细胞或单核细胞。

5.如权利要求1-4中任一项所述的方法，其中，所述感兴趣的细胞是T细胞。

6.如权利要求1-5中任一项所述的方法，其中，所述感兴趣的细胞是CD3+细胞、CD4+细胞、CD8+细胞。

7.如权利要求1-6中任一项所述的方法，其中，所述适体包含标记。

8.如权利要求1-7中任一项所述的方法，其中，分开步骤(b)包括使用第一固体支持物或相变剂。

9.如权利要求1-8中任一项所述的方法，其中，所述适体(i)缀合或固定至第一固体支持物；和/或(ii)被亲和对的第一成员标记。

10.如权利要求9所述的方法，其中，分开步骤(b)包括(i)从所述生物样品中去除通过所述适体结合至所述第一固体支持物的所述与适体结合的细胞；或(ii)添加带有所述亲和对的第二成员的第二固体支持物，以允许通过所述亲和对的所述第一成员和所述第二成员的相互作用使所述适体物理缔合至所述第二固体支持物，并从所述生物样品中去除所述与适体结合的细胞。

11.如权利要求9或10所述的方法，其中，所述适体缀合至相变剂。

12.如权利要求9-11中任一项所述的方法，其中，接触步骤(a)在所述相变剂处于溶液相的条件下进行；其中，分开步骤(b)包括诱导所述相变剂从溶液中沉淀，从而从所述生物样品中去除与适体结合的细胞。

13.如权利要求8-12中任一项所述的方法，其中，所述第一固体支持物和/或所述第二固体支持物包括磁响应珠。

14.如权利要求8-12中任一项所述的方法，其中，所述第一固体支持物和/或所述第二固体支持物包括聚合物、金属、陶瓷、玻璃、水凝胶或树脂。

15.如权利要求13所述的方法，其中，分开步骤包括使所述样品经受磁场，从而将包含与适体结合的细胞的固体支持物与所述生物样品分开。

16.如权利要求1-15中任一项所述的方法，其中，逆转剂包括聚阴离子、小分子或寡核苷酸或寡核苷酸模拟物，所述寡核苷酸或寡核苷酸模拟物包含与所述适体的序列充分互补的序列以与所述适体杂交，从而破坏所述适体与所述细胞表面标志物的结合。

17.如权利要求1-16中任一项所述的方法，其中，所述与适体结合的细胞包含对选定的标志物对呈双重阳性的细胞，所述标志物对包括所述适体所结合的标志物。

18.如权利要求1-17中任一项所述的方法，其中，分离的细胞级分包含对选定的标志物对呈双重阳性的细胞，所述标志物对包括所述适体所结合的标志物。