[发明专利]进行实时PCR的方法

权利要求书

1.进行核酸扩增过程（10）的方法，其中，在分开的反应批次中扩增样品核酸（31；51；61；71）和参比核酸（32-35；52-54；62-64、72-73），其特征在于，实时观察扩增信号，并且根据扩增信号来动态调节扩增循环的数量和/或扩增过程的持续时间。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，在实时PCR的范畴中进行所述核酸的扩增，并且所述扩增的循环是PCR循环。

3.根据权利要求1或权利要求2所述的方法，其特征在于，当已经进行了可预定的最小数量的扩增循环和/或可预定的最小持续时间的扩增过程时，开始实时观察和/或评估所述扩增信号。

4.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，当样品核酸的扩增的信号强度达到和/或超过参比核酸的扩增的信号强度时，结束所述过程。

5.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，当已经进行了可预定的最大数量的扩增循环和/或可预定的最大持续时间的扩增过程时，终止所述过程。

6.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，与各自进行的扩增循环和/或可规定的时间点相关地观察扩增信号，并且在各自循环或各自时间点的信号显著增加的情况下将其归类为“扩增”，并且采用样品核酸和参比核酸之间的归类的比较以进行评估。

7.根据权利要求6所述的方法，其特征在于，将扩增过程的结果评估为指标向量图，其中，将被归类为“扩增”的循环或时间点赋值为指标值“1”，而将其它循环或时间点赋值为指标值“0”。

8.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，用所述方法确定和/或控制所述样品核酸（31）的初始量，其中，并行地随同执行至少两个具有特定初始量的参比核酸的对比样品（32-35）。

9.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法用作感染检测，其中，并行地随同执行至少一个具有如下浓度的要检测的核酸的对比样品（52），所述浓度代表用于感染检测的检测下限。

10.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法用作突变检测，其中，随同执行具有特定浓度的包含100％比例的要检测的突变的核酸的对比样品（64），和具有特定浓度的包含0％比例的要检测的突变的核酸的对比样品（62）。

11.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述方法用于全基因组扩增，其中，随同执行至少一个具有特定浓度的参比基因组核酸的第一对比样品（73）。

12.根据权利要求11所述的方法，其特征在于，还随同执行没有要扩增的核酸的第二对比样品（72）和/或具有特定量的参比基因组核酸的第三对比样品（74），其中，第三对比样品的特定量对应于全基因组扩增中希望的扩增产物目标量，并且其中，第三对比样品的反应批次不包含扩增酶，并且其中，扩增的信号归因于嵌入在双链DNA中的荧光染料的使用。

13.根据权利要求11或权利要求12所述的方法，其特征在于，所述方法用于控制预扩增。

14.根据前述权利要求中任一项所述的方法，其特征在于，所述扩增过程是具有第一多重PCR和至少一个第二单重PCR的嵌套式PCR，其中，利用所述方法控制所述第一多重PCR中扩增的核酸的量。

15.用于控制核酸扩增过程的计算机程序，其特征在于，所述计算机程序被设置用于进行根据权利要求1至14中任一项所述的方法。