[发明专利]一种鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法

权利要求书

1.一种鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，其特征在于，包括如下步骤：

S1、采用不同品种的油菜植株作为测试对象，获取甘蓝蚜对各品种油菜植株取食行为的EPG 参数；

S2、对所述EPG 参数进行筛选，选择出与油菜抗蚜性鉴定相关性最强的一组EPG参数进行研究；

S3、所述与油菜抗蚜性鉴定相关性最强的一组EPG参数中，若与E1波相关的EPG参数越大，与E2波相关的EPG参数越小，表明该品种的油菜抗蚜性越强，反之则表明该品种的油菜抗蚜性越弱；

所述S1中采集蚜虫对油菜取食行为的EPG参数的方法，包括如下步骤：

（1）将甘蓝蚜用导电银胶将金丝一端固定于背部后，放置于繁育蚜虫的植株上过夜适应，同时选择油菜植株作为测试对象；

（2）将金丝的另外一端接到DC-EPG 系统上，同时将植物电极插入植株土壤中，再将饥饿处理后且连接金丝的甘蓝蚜置于油菜植株上，在法拉第笼中进行试验；

当甘蓝蚜的口针刺入植物组织时，由甘蓝蚜口针为微电极和植物根部土壤为参比电极构成的回路接通，获取甘蓝蚜在油菜植株上对应至少6h取食行为所产生的一系列电信号；

（3）将上述电信号经DC-EPG系统放大处理后，转化成数字信号，再以波形数据的形式进行记录，获取蚜虫在油菜上对应取食行为的EPG波形；

（4）将EPG波形进行类比、分析以及认定，参照蚜虫取食行为与EPG波形的对应关系，将EPG 波形划分为5种类型：口针在植株外部产生的非刺探波np，口针在表皮以及叶肉中穿刺、唾液分泌以及其它行为产生的路径波C，口针在细胞内穿刺产生的电势降pd，口针在韧皮部内分泌唾液产生的分泌波E1和口针在韧皮部取食产生的取食波E2；

（5）将上述EPG波形包含的口针在植株外部产生的非刺探波np、口针在表皮以及叶肉中穿刺、唾液分泌以及其它行为产生的路径波C、口针在细胞内穿刺产生的电势降pd、口针在韧皮部内分泌唾液产生的分泌波E1、口针在韧皮部取食产生的取食波E2对应的时间、次数进行统计、筛选，获得蚜虫对油菜取食行为的EPG参数；

所述“与E1波相关的EPG参数越大，与E2波相关的EPG参数越小”具体为“E1波占韧皮部阶段的百分比越大”，即若E1波占韧皮部阶段的百分比越大，表明该品种的油菜抗蚜性越强，反之则表明该品种的油菜抗蚜性越弱；

所述“与E1波相关的EPG参数越大，与E2波相关的EPG参数越小”具体为“E2的总持续期越小”，即若E2的总持续期越小，表明该品种的油菜抗蚜性越强，反之则表明该品种的油菜抗蚜性越弱；

所述与E1波相关的EPG参数包括：d_E1followedby1sE2、s_E1followedbysE2、s_E1、s_E2、s_longestE2；

所述d_E1followedby1sE2为后面接第一个持久E2的E1波的持续期；

所述s_E1followedby1sE2为后面接持久E2的E1的总持续期；

所述s_E1为E1的总持续期；

所述s_E2为E2的总持续期；

所述s_longestE2为最长E2的持续时间；

短暂探测的次数即持续时间＜3min的路径波C的次数；若短暂探测的次数越多，C波的总占比越高，表明该品种油菜抗蚜性越强，反之则表明该品种的油菜抗蚜性越弱；所述与短暂探测次数相关的EPG参数包括：n_pd/n_Pr、n_bPr；

所述n_pd/n_Pr为每次探测中pd波的平均发生次数；

所述n_bPr为短暂探测的次数；

若探测的总时间越长，非探测的总时间越短，表明该品种的油菜抗蚜性越弱；反之则表明该品种的油菜抗蚜性越强。

2.根据权利要求1所述鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，其特征在于，采集蚜虫对油菜取食行为的EPG参数的方法步骤（1）中，所述甘蓝蚜为新羽化2天的无翅甘蓝蚜；所述油菜植株为发育到4叶期的油菜植株。

3.根据权利要求1或2所述鉴定不同品种油菜抗蚜性的方法，其特征在于，采集蚜虫对油菜取食行为的EPG参数的方法步骤（2）中，所述饥饿处理的时间为1h；所述DC-EPG系统为荷兰Wageningen University 生产的Giga4 型号的4 通道的DC-EPG 系统；

所述DC-EPG 系统的一个通道只能连接一根长2cm，直径18µm的金丝，一根金丝也只能连接一头甘蓝蚜。