[发明专利]一种嗜酸乳杆菌的液体发酵菌剂的制备方法

权利要求书

1.一种嗜酸乳杆菌的液体发酵菌剂的制备方法，其特征在于，包括如下步骤：

步骤一，一级种子培养：将嗜酸乳杆菌接种在一级种子培养基上，在37℃、转速50-100rpm的条件下培养10-12h得到一级种子液；

步骤二，将步骤一获得的所述一级种子液接种到二级种子培养基中，接种量为1-2％，在37℃、转速100-150rpm的条件下培养6-8h得到二级种子液；

步骤三，发酵培养基的制备与灭菌：

(1)原料粉筛：将玉米和豆粕粉碎，过筛；

(2)上罐：称取所需发酵培养基原料组分，与少量水混合后加入发酵罐中，继续加水至所需刻度，300-400rpm下搅拌混匀20-30min制备发酵培养基；

(3)对所述发酵培养基进行实消灭菌；

步骤四，混合接种培养：

(1)混合接种：将步骤二得到的所述二级种子液按照1.2-2.2％的接种量接种到步骤三灭菌后的所述发酵培养基中，在33-35℃、转速为300-400rpm的条件下混合20-30min；

(2)发酵培养：混合之后，在33-35℃、转速150-200rpm的条件下培养时间8-10h；

步骤五，补料及后发酵：发酵培养后，以20L/h的速度补充5-10％发酵液体积的营养培养基，在33-35℃、转速150-200rpm的条件下，培养时间2-4h；

步骤六，分装打包：下罐、收集菌液，分装、打包，即得液体发酵菌剂。

2.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的液体发酵菌剂的制备方法，其特征在于，所述一级种子培养基的组成成分及其浓度为：葡萄糖15-20g/L，胰蛋白胨8-10g/L，酵母浸膏8-10g/L，磷酸二氢钾1-2g/L，硫酸镁0.3-0.58g/L，硫酸锰0.15-0.25g/L，乙酸钠3-5g/L，柠檬酸二胺1.5-2g/L。

3.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的液体发酵菌剂的制备方法，其特征在于，步骤一中所述嗜酸乳杆菌在所述一级种子培养基上的接种量为1-2％。

4.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的液体发酵菌剂的制备方法，其特征在于，所述二级种子培养基的组成成分及其浓度为：葡萄糖15-20g/L，胰蛋白胨8-10g/L，酵母浸膏8-10g/L，磷酸二氢钾1-2g/L，硫酸镁0.3-0.58g/L，硫酸锰0.15-0.25g/L，乙酸钠3-5g/L，柠檬酸二胺1.5-2g/L。

5.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的液体发酵菌剂的制备方法，其特征在于，步骤三中所述玉米和豆粕的粒径为60-80目。

6.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的液体发酵菌剂的制备方法，其特征在于，步骤三中所述实消灭菌的过程中设置的参数为：温度115-121℃，灭菌时间25-35min，压力控制0.08-0.15Mpa。

7.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的液体发酵菌剂的制备方法，其特征在于，所述发酵培养基的组成成分及其浓度为：葡萄糖10-20g/L，玉米粉3-5g/L，豆粕粉15-20g/L，牛肉浸粉5-8g/L，磷酸二氢钾1-2g/L，硫酸镁0.3-0.58g/L，硫酸锰0.15-0.25g/L，乙酸钠3-5g/L，柠檬酸二胺1.5-2g/L。

8.根据权利要求1所述的嗜酸乳杆菌的液体发酵菌剂的制备方法，其特征在于，所述营养培养基的组成成分及其浓度为：葡萄糖5-10g/L，胰蛋白胨2-5g/L，牛肉浸粉3-5g/L。

9.一种如权利要求1-8任意一项所述的制备方法制备的液体发酵菌剂。