[发明专利]一种干酪乳杆菌Y16及其在制备具有抗肿瘤作用的发酵豆乳中的应用

说明书

本发明公开了一种干酪乳杆菌Y16及其在制备具有抗肿瘤作用的发酵豆乳中的应用，属于生物应用技术领域。所述菌种的保藏号为CCTCC NO：M 2018557，制备具有抗肿瘤作用的发酵豆乳的方法包括MRS培养基制备，活化菌株，菌株培养，制备普通豆乳及制备发酵豆乳等步骤，本发明的优点在于所制备的发酵豆乳具有抑制肿瘤细胞增殖的功能性和保健性。

技术领域

本发明属于生物应用技术领域，具体涉及一种干酪乳杆菌Y16及其在制备具有抗肿瘤作用的发酵豆乳中的应用。

背景技术

乳酸菌作为革兰氏阳性细菌，在发酵过程中能够释放有机酸等物质于发酵制品中，使发酵制品具有特殊的风味以及功能。

大豆作为我国种植最广泛的农作物之一，其中的大豆异黄酮具有调控细胞增殖，进而对人体组织器官产生影响，而苷元型异黄酮具有很好的抗氧化、抑制肿瘤增殖的效果。

发酵豆乳是一种发酵型豆浆制品，它采用乳酸菌菌种发酵，在37℃下发酵24h制成，为了避免杂菌污染，应用于发酵的豆浆在105℃下灭菌15min，保证其内再无微生物污染。目前，市场上暂无干酪乳杆菌发酵豆乳制品，因此市场前景良好。

发明内容

本发明的目的是提供一种干酪乳杆菌Y16及其在制备具有抗肿瘤作用的发酵豆乳中的应用。

为实现上述目的，本发明提供了一种干酪乳杆菌(Lactobacillus casei)Y16，所述菌种的保藏编号为CCTCC NO：M 2018557。

本发明还提供了一种干酪乳杆菌Y16在制备具有抗肿瘤作用的发酵豆乳中的应用。

进一步地，所述应用包括如下步骤：

(1)将干酪乳杆菌Y16接种到MRS培养基上培养，得干酪乳杆菌Y16培养液；

(2)制备普通豆乳：大豆泡发后进行磨制、过滤、灭菌备用；

(3)将步骤(1)得到的干酪乳杆菌Y16培养液接种于步骤(2)所得普通豆乳中培养，得发酵豆乳；

(4)将步骤(3)所得发酵豆乳进行预冻、冻干，再将发酵豆乳冻干物与提取液混合后室温超声、离心，取上清液，去除溶剂，即得具有抗肿瘤作用的发酵豆乳。

进一步地，上述技术方案中，所述步骤(1)中干酪乳杆菌Y16的接种量为重量计2％，培养时间为18h。

进一步地，上述技术方案中，所述步骤(2)制备普通豆乳的方法为：将大豆用去离子水清洗2-3次，以两倍重量份去离子水浸泡12-20h，浸泡获得大豆中加入4～6倍重量份去离子水进行磨豆，过滤，经105℃灭菌15min，冷却至37℃备用。

进一步地，上述技术方案中，所述步骤(3)中干酪乳杆菌Y16的接种量为重量计2％，培养时间为24h。

进一步地，上述技术方案中，所述步骤(4)中发酵豆乳预冻的温度为-30℃；提取液为80％乙醇溶液或水。

进一步地，上述技术方案中，所述步骤(4)中提取液与发酵豆乳冻干物按质量比为20:1混合，超声条件为100w、超声6h；离心条件为10000r/min、4℃离心10min。

进一步地，上述技术方案中，所述步骤(4)中去除溶剂的方法包括真空浓缩或真空冻干。

进一步地，上述技术方案中，所述具有抗肿瘤作用的发酵豆乳作用的肿瘤细胞种类为购买于上海细胞库中的人结肠癌HT-29细胞(中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库目录号SCSP-5032)、人结肠癌Caco-2细胞(中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库目录号TCHu146)或肝癌HepG2细胞(中国科学院典型培养物保藏委员会细胞库目录号SCSP-510)。