[发明专利]用于侵袭性甲状腺乳头状癌诊断的循环环状RNA标志物及应用

说明书

本发明属于生物检测技术领域，具体公开了一种用于侵袭性甲状腺乳头状癌诊断的循环环状RNA标志物及应用，该侵袭性甲状腺乳头状癌诊断的生物标志物为循环环状RNA，所述循环环状RNA为circ_0058090和circ_0014188。本发明生物标记物具有高敏感性和特异性，能有效用于侵袭性PTC的诊断，可以显著提高患者生存。

技术领域

本发明属于生物医药领域，具体涉及一种侵袭性甲状腺乳头状癌诊断的生物标志物及其应用。

背景技术

甲状腺癌是常见的内分泌系统恶性肿瘤之一，其发病率逐年增加，每年有超53990新发病例，其主要组织学分型为乳头状癌，占全部病例75％以上。尽管大部分甲状腺乳头状癌(PTC)患者预后较好，5年生存率高达95％，但仍有13％至15％的患者表现出甲状腺外侵袭特征，容易侵犯喉、气管、食管、颈部大血管等重要器官结构，容易发生区域淋巴结和远处转移，这种侵袭性特征导致疾病具有更高的复发率和死亡率，局部无法控制的严重外侵是患者死亡的主要原因。

甲状腺外侵犯(ETE)是PTC患者预后不良的独立预测因子。针对侵袭性PTC通常需要积极的诊疗模式，因此我们亟需对高侵袭性PTC进行早期诊断，必须在术前对PTC进行恰当评估，鉴别侵袭与非侵袭性PTC，了解侵袭的可能性及程度，既可以防止过度治疗，又可以避免治疗不足。

目前，术前常规的B超和细针穿刺病理学检查对这部分高侵袭性PTC不能进行有效地早期鉴别。在分子生物学研究方面，尚缺乏高水平的研究筛选可靠的分子标志物以诊断和鉴别具有高侵袭性特征的PTC。因此，鉴定用于早期诊断侵袭性PTC的新型生物标志物对改进此类患者临床治疗策略，改善预后起着重要作用。

环状RNA(circRNA)是一类不同于线性RNA的内源非编码RNA，它是通过反向剪接形成的共价闭合环状RNA分子，不具有5'端帽子和3'端polyA尾巴结构，不受RNA外切酶影响，稳定且广泛地存在于生物界。高通量测序技术已在真核生物中鉴定了数千种具有高序列保守性和细胞类型特异性表达的circRNA。近年来研究发现，circRNA在细胞生物学中起着多重作用，如miRNA海绵、转录调节因子、RBP结合分子、蛋白质翻译模板和免疫调节因子。circRNA在神经系统紊乱、糖尿病和肿瘤等疾病发生过程中起着较为重要的作用。随着高通量芯片和RNA测序技术以及生物信息学的进展。在临床上，已经鉴定出大量异常表达的circRNAs与乳腺癌，肝癌，胃癌，结肠直肠癌和肺癌等癌症中的临床病理学特征相关。由于circRNA具有高稳定性，核酸外切酶抗性等特性，circRNAs已有报道作为癌症诊断和预后的新型生物标志物。最近的研究表明circRNA在人外周血中富集，血液成分中的circRNA可用作生物标志物。在结肠直肠癌(colorectal carcinoma，CRC)中，Hsa_circ_001569的上调与CRC的侵袭性特征相关。在PTC中，has_circ_0008274、hsa_circ_0004458、hsa_circ_0072088表达失调并与不良预后相关。在胃癌中，hsa_circ_0000190在胃癌组织和血浆样本中的表达水平均下调，其表达水平与肿瘤直径、淋巴转移、远处转移、TNM分期及CA19-9水平相关，可能成为胃癌的一种新型的非侵入性生物标志物。

迄今，尽管对PTC的生物标志物进行了广泛的研究，但重点关注侵袭性PTC的循环circRNAs诊断效果的研究很少。

发明内容