[发明专利]一种利用微生物转化生产7α-羟基-脱氢表雄酮的方法

权利要求书

1.一种利用微生物生产7α-OH-DHEA的方法，其特征在于，以蓝色犁头霉为生产菌株，经过孢子悬浮液制备、种子培养、发酵培养及改善转化条件后转化底物DHEA得到产物7α-OH-DHEA。具体步骤如下：

将蓝色犁头霉AL-172种子液以10％-15％接种量转接入发酵培养基，25-30℃，170-200r/min发酵培养5-8h后，先使用0.3-1.0g/L的DHEA进行诱导，待培养pH至3.8-4.2时，调节发酵液pH至5.6-6.0，同时向发酵培养基中投入浓度2-5g/L的DHEA，转化5-7h后，再次调节发酵液pH至5.4-6.0，补齐剩余底物使得总投料浓度达到3-8g/L，继续转化。转化过程中定时对发酵液取样，测定产物生成率。

2.一种权利要求一种微生物生产7α-OH-DHEA的方法，其特征在于，所述具体菌株为蓝色犁头霉(Absidia coerulea)AL-172，保藏编号:CGMCC14124。

3.如权利要求1所述一种微生物生产7α-OH-DHEA的方法，其特征在于，所述种子培养基组分(g/L)：玉米浆12，葡萄糖10.5，硫酸铵5，酵母膏2-3；水配制，pH6.5。

发酵培养基组分(g/L)：玉米浆12，葡萄糖11，硫酸铵5，酵母膏2-3；水配制，pH6.5。

4.一种权利要求1所述的一种微生物生产7α-OH-DHEA的方法，其特征在于，所述的种子培养液条件如下：将蓝色犁头霉孢子悬浮液1mL接种于种子培养基中(30/250ml三角瓶)，在温度26-30℃，转速180-210r/min条件下培养至pH到3.6-4.0,制得蓝色犁头霉种子液。

5.一种权利要求1所述的一种微生物生产7α-OH-DHEA的方法，,其特征在于，所述的孢子悬浮液制备方法：无菌水将菌种斜面孢子洗下，6层纱布过滤，振荡摇匀，血球计数板计数，调整孢子悬浮液浓度3-10×10⁷个/mL。