[发明专利]硫酸化岩藻寡糖作为PCSK9抑制剂的应用

权利要求书

1.硫酸化岩藻寡糖作为PCSK9抑制剂的应用。

2.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述硫酸化岩藻寡糖的结构式如下：

取代基W，X，Y和Z 可以是，H, SO₃^2-, 硫酸化的单糖，非硫酸化的单糖，硫酸化的糖醛酸，非硫酸化的糖醛酸。

3.根据权利要求1所述的应用，其特征在于：所述硫酸化岩藻寡糖类化合物的分子量分别为：200-2000 Da。

4.根据权利要求1-3所述的应用，其特征在于：所述硫酸化岩藻寡糖提取自褐藻或棘皮动物，褐藻为泡叶藻、海带，棘皮动物为海参。

5.根据权利要求4所述的应用，其特征在于：所述硫酸化岩藻寡糖的制备方法包含有如下步骤：

（1）岩藻多糖粗品提取：将原材料清洗除去泥沙，浸泡除盐，粉碎机粉碎，烘干，再次粉碎，过筛；. 在粉碎干燥物中加入3-10倍体积的石油醚或乙酸乙酯，90-95℃冷凝回流除去大部分色素、脂质；滤渣干燥，研磨，采用水提法或木瓜蛋白酶法提取得岩藻多糖粗品；

（2）岩藻聚糖的制备：上步制得的岩藻多糖粗品先经阴离子交换柱，采用ÄKTApure 150进行分离纯化，0-2mol/L的氯化钠线性洗脱，收集峰对应组分，经浓缩、透析、冷冻干燥得岩藻聚糖半成品，上述岩藻聚糖半成品再经凝胶柱层析，即可分离得到岩藻聚糖成品，经液相色谱分析确定其为岩藻聚糖；

（3）硫酸化岩藻寡糖的制备：在上述步骤制得的岩藻聚糖配制成浓度为4-5mg/mL的溶液，在其中加入酸，使酸的终浓度为0.4-0.5mol/L， 50-70℃搅拌过夜；次日，加入碱中和后，加入90-100%乙醇至乙醇的终浓度达65-80%；3000-5000×g离心去除沉淀，收集上清液，旋转蒸发仪蒸干；重溶于去离子水中，上样柱层析，结合苯酚硫酸法或示差折光检测器收集各寡糖组分；所获得的寡糖组分，经液相色谱法确定单糖组成，合并收集，质谱法确证硫酸化岩藻寡糖的结构。

6.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述阴离子交换柱采用DEAE-52阴离子交换柱或Q-Sepharose F.F阴离子交换柱；所述凝胶柱采用Sephacryl S-300凝胶柱、Sephacryl S-200丙烯葡聚糖凝胶柱或Sephadex G-200葡聚糖凝胶柱；所述柱层析采用Bio-Gel P4、 Bio-Gel P6或Sephadex G10进行柱层析。

7.根据权利要求5所述的应用，其特征在于：所述的酸为盐酸、三氟乙酸、硫酸、柠檬酸和乙酸；所述的碱为氢氧化钠、氢氧化钾。