[发明专利]一株分泌双咪苯脲单克隆抗体的杂交瘤细胞株A11S及其应用有效
| 申请号： | 201911322426.8 | 申请日： | 2019-12-20 |
| 公开（公告）号： | CN110950962B | 公开（公告）日： | 2022-03-15 |
| 发明（设计）人： | 胥传来;许晓昕;匡华;徐丽广;刘丽强;吴晓玲;宋珊珊;孙茂忠;郝昌龙;胡拥明 | 申请（专利权）人： | 江南大学 |
| 主分类号： | C07K16/44 | 分类号： | C07K16/44;C12N5/20;C07K14/765;G01N33/577 |
| 代理公司： | 无锡市大为专利商标事务所(普通合伙) 32104 | 代理人： | 时旭丹;张仕婷 |
| 地址： | 214122 江苏省无锡市滨湖区蠡湖大*** | 国省代码： | 江苏;32 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 分泌 双咪苯脲 单克隆抗体 杂交瘤 细胞株 a11s 及其 应用 | ||
1.一株分泌双咪苯脲单克隆抗体杂交瘤细胞株A11S，已保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心CGMCC，地址北京市朝阳区北辰西路1号院3号中国科学院微生物研究所，分类命名为单克隆细胞株，保藏日期2019年10月14日，保藏编号CGMCC No.18517。
2.双咪苯脲单克隆抗体，其特征在于：它由权利要求1所述保藏编号为CGMCC No.18517的分泌双咪苯脲单克隆抗体的杂交瘤细胞株A11S分泌产生。
3.权利要求2所述双咪苯脲单克隆抗体的应用，其特征在于：用于食品安全检测中双咪苯脲残留的分析检测。
4.根据权利要求1所述分泌双咪苯脲单克隆抗体杂交瘤细胞株A11S，其特征在于用于制备杂交瘤细胞株的完全抗原双咪苯脲IMI-BSA的制备过程如下：称取4.38mg 半抗原双咪苯脲IMI衍生物，溶解于300μL N,N-二甲基甲酰胺DMF中，冰水浴条件下搅拌反应10min；在冰水浴的条件下，滴加48μL、浓度为1M的HCl进行酸化0.5h，得到酸化好的IMI衍生物溶液；再称取150mg 亚硝酸钠，用500μL 纯水充分溶解得到亚硝酸钠溶液；将5.56μL亚硝酸钠溶液加入到酸化好的IMI衍生物溶液中，冰水浴条件下反应0.5-1h，称为A液；取6mg BSA，用2mL 0.01M、pH=9.0的碳酸盐缓冲溶液CB溶解，称为B液；再逐滴将A液缓慢加入到B液中，冰水浴条件下反应4h；然后用0.01M PBS溶液透析，除去未反应的小分子半抗原，得到完全抗原IMI-BSA，并通过紫外吸收扫描方法进行鉴定。
5.根据权利要求4所述分泌双咪苯脲单克隆抗体杂交瘤细胞株A11S，其特征在于：所述半抗原双咪苯脲IMI与牛血清白蛋白BSA的摩尔比为60：1。
6.根据权利要求4所述分泌双咪苯脲单克隆抗体杂交瘤细胞株A11S，其特征在于：所述半抗原双咪苯脲IMI的结构式如下：
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