[发明专利]一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法

说明书

本发明公开了一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7‑ADCA的方法，以头孢氨苄结晶母液为原料，向原料中加入碱性试剂和头孢氨苄裂解酶，经过脉冲超声处理，分离出裂解酶和苯甘氨酸固体，过滤出的液体经过结晶得到7‑ADCA固体，本发明通过降低酶解反应时的pH值，不仅7‑ADCA的收率没有下降，收率在98.5%以上，而且7‑ADCA的品质大幅度提升，同时还能够得到头孢氨苄裂解酶和苯甘氨酸固体，具有工艺简单、绿色环保、适合大规模工业化生产等优点。

技术领域

本发明涉及一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，属于化学医药领域。

背景技术

头孢氨苄是第一代半合成头孢菌素，属于国家基本药物，为礼来公司上世纪七十年代原研上市产品。7-氨基去乙酰氧基头孢烷酸(简称7-ADCA)是一种合成头孢类抗菌素的重要中间体，在医药工业上主要用于合成头孢氨苄、头孢拉定和头孢羟氨苄等头孢菌素，由于头孢菌素具有抗菌谱广，毒副作用小，无过敏反应及可以口服等特点，临床应用广泛，因此7-ADCA在医药行业中占有重要地位。

头孢氨苄的制备工艺一般以7-ADCA为起始原料，制备方法有化学合成法和酶促合成法两种，两种合成方法都会产生大量残留头孢氨苄的结晶母液(即本发明的原料-头孢氨苄结晶母液)，目前多采用β-萘酚复合方式回收结晶母液，但β-萘酚毒性大，使用后在药品中会有微量残留，给药品带来质量风险。

李丽娟等在《树脂吸附法回收头孢氨苄工艺研究》中阐述了一种采用树脂吸附法从头孢氨苄结晶母液中回收头孢氨苄的方法，需经过吸附、解析、解析液浓缩等工艺步骤，相对本发明步骤多、工艺时间长、难度大。

王艳艳等在《酶法合成头孢氨苄工艺研究》中提到一种从头孢氨苄结晶母液中回收7-ADCA的方法，但反应过程中需要纳滤浓缩，工艺难度大，工艺时间长。

发明内容

本发明需要解决的技术问题是提供一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，能够回收头孢氨苄结晶母液中的有效成分，得到的7-ADCA收率高、品质好，同时还能够回收头孢氨苄裂解酶和苯甘氨酸固体。

为解决上述技术问题，本发明所采用的技术方案是：

一种超声辅助头孢氨苄裂解酶制备7-ADCA的方法，以头孢氨苄结晶母液为原料，向原料中加入碱性试剂和头孢氨苄裂解酶，经过脉冲超声处理，分离出头孢氨苄裂解酶和苯甘氨酸固体，过滤出的液体经过结晶得到7-ADCA固体。

本发明技术方案的进一步改进在于：包括如下步骤：

A.调节pH值：将头孢氨苄结晶母液用碱性试剂调节pH值为7.0～8.0，控制温度得到反应液；

B.酶解反应：向反应液中加入头孢氨苄裂解酶进行酶解反应，在酶解反应开始后对酶解体系采用脉冲超声处理一段时间，直至头孢氨苄残留合格，终止酶解反应；

C.过滤得到头孢氨苄裂解酶和苯甘氨酸固体：过滤分离出头孢氨苄裂解酶、苯甘氨酸固体和过滤液，过滤液进行脱色处理，得到脱色液；

D.结晶得到7-ADCA：将脱色液用酸性试剂调节pH值进行结晶，控制结晶温度，养晶一段时间，然后过滤、洗涤、干燥得到7-ADCA。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤A中结晶母液中头孢氨苄初始含量为(15～20)mg/ml，碱性试剂为氨水或三乙胺，浓度为0.5mol/L，温度为10～20℃。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤A中头孢氨苄裂解酶用量为结晶母液中所含头孢氨苄理论重量的0.5～1倍。

本发明技术方案的进一步改进在于：所述步骤B中头孢氨苄含量≤0.5mg/ml时残留合格，终止酶解反应，检测方式采用HPLC检测，脉冲超声处理条件为：频率20kHz，功率10W/L～50W/L、工作/间歇比为0.5s/1s～5s/1s，处理时间10-60min。