[发明专利]双功能融合多肽、细胞和药物组合物及应用

说明书

本发明提供一种双功能融合多肽、细胞和药物组合物及应用。本发明的双功能融合蛋白具有协同作用，大大提高了阻断HLA‑E与NKG2A/CD94的结合效果，解除HLA‑E通过NKG2A/CD94通路对NK细胞和T细胞的抑制作用，增强免疫细胞对肿瘤细胞的杀伤作用，在体外实验中，表现出良好的抗肿瘤效果。

技术领域

本发明涉及免疫学以及医药领域，具体地涉及双功能融合多肽、细胞和药物组合物及应用。

背景技术

自然杀伤(NK)细胞是除T细胞和B细胞之外的第三类淋巴细胞，其不仅是重要性的外向性自然防御细胞，且也参体内的多种免疫细胞的调节，约占人肝脏内淋巴细胞的25％-40％。NK细胞在抑制癌症的发展中具有重要的作用，能够通过产生细胞因子和细胞毒性活动来杀伤肿瘤细胞。NK细胞的活性通过激活和抑制受体来调节。NK细胞表达多种活化受体和抑制性受体，活化受体包括NKG2D、NKG2C、CD226(DNAM-1)、2B4、CD16和天然细胞毒受体(NCR)家族的NKp46、NKp30及NKp44等，抑制性受体主要有杀伤细胞免疫球蛋白样受体(KIRs)、CD94/NKG2A、TIGIT和CD96等。

研究表明，在肿瘤微环境下，不仅NK细胞的活化受体的表达会受到影响，NK细胞功能的丧失还与抑制性受体表达的上调有关，许多肿瘤微环境中的NK细胞表现为抑制性受体(如NKG2A、KIR)表达增加，用KIR或NKG2A阻断性抗体处理可明显恢复NK细胞的活化和功能。同时，肿瘤细胞亦能通过下调自身所表达的NK细胞活化受体的配体的表达或者上调NK细胞抑制性受体的配体来逃逸NK细胞的识别与攻击。其作用于NK细胞活化受体表达下调主要表现在活化受体NKG2D及其配体MICA、MICB及ULBPs和NKp30的配体B7-H6,BAG6，而抑制性受体配体表达的上调主要表现在CD94/NKG2A的配体HLA-E和ILT2/4及KIR2DL4的配体HLA-G。

由于抑制性受体在调控自然杀伤细胞活化中发挥关键的免疫检查点(checkpoint)作用，且肿瘤微环境存在NK细胞抑制性受体表达占优势的免疫耐受状态。这种免疫检查点阻断疗法亦适用于基于激活NK细胞的抗肿瘤免疫治疗，通过阻断NK细胞抑制性信号纠正NK受体失衡的免疫功能状态，从而增强NK细胞抗肿瘤免疫应答，因此展示出很好的应用前景。

例如，靶向重要的NK细胞抑制性受体的单抗药物IPH2201正在进行复发或难治性慢性淋巴细胞白血病的I期和II期实验治疗(NCT02557516)。NK细胞表达TIM-3和LAG-3抑制性免疫检查点受体，其在肿瘤患者NK细胞高表达，促进肿瘤微环境NK细胞的免疫抑制状态。目前，抗TIM-3单抗药物MBG453正开始招募参与者单独或与抗PD-1单抗联合用于肺癌、肾癌等恶性肿瘤的I期和II期临床实验性治疗(NCT02608268)。抗LAG-3单抗也正在进行难治性或复发性白血病、淋巴瘤和多发性骨髓瘤的I期临床实验性治疗(NCT 02061761)或与抗PD-1单抗联合用于肝癌、宫颈癌、卵巢癌、膀胱癌、肾癌和非小细胞肺癌等进展期实体瘤的实验性治疗(NCT 01968109)。