[发明专利]一种罗非鱼早期快速培育方法

权利要求书

1.一种罗非鱼早期快速培育方法，其特征在于：它包括以下步骤：

步骤一，制备超雄亲鱼；

步骤二，将超雄亲鱼以及正常雌鱼放入繁殖场所进行催化繁殖；

步骤三，对种苗进行增重饲养，以期尽早投入鱼塘生产。

2.根据权利要求1所述的一种罗非鱼早期快速培育方法，其特征在于：所述超雄繁殖配对的方法为：

S1，选择体型匀称且性别未分化的幼年鱼苗作为雌化对象；

S2，对其雌化处理；

S3，对其进行子代测试鉴定，保留成功转化的雌鱼，是为转化雌鱼；

S4，将转化雌鱼(XY△♀)与原系雄鱼(XY△♂)交配；

S5，将S4交配得到的鱼苗进行子代测试鉴定，保留YY超雄鱼；

S6，将YY超雄鱼与转化雌鱼(XY△♀)交配；

S7，将S6得到的鱼苗在尚未性别分化前进行雌化处理；

S8，将S7得到的鱼苗进行子代测试鉴定，保留YY基因型鱼，也就是YY转化雌鱼；

S9，将YY转化雌鱼与YY超雄鱼交配，得到全YY超雄鱼，作为超雄亲鱼。

3.根据权利要求2所述的一种罗非鱼早期快速培育方法，其特征在于：所述子代测试鉴定方法为：

(1)采集待鉴别的罗非鱼样品的血样或鳍条，提取基因组DNA；

(2)用步骤(1)获得的基因组DNA为模板，选用9个微卫星引物进行PCR扩增，这9对特异微卫星引物名称、序列及退火温度如下:

正向引物DNA序列(5'-3')反向引物DNA序列(5'-3')退火温度

GTTTTGCAGCACATCACCTG GCCACAGTGACTTGACCACA 59℃

AGCTGCTGGGTGCTCTGA CTGCAACCTGCAGAGGAAAC 59℃

TGCTGGTTAAAAGAAAGAATG TTATGGGTGTTTAGTCTGGAA 55℃

TATAGAGGGGTGAGGGGAGAT AGAATACAAGCGCCACACAT 55℃

TCGTGCAGCCAAACTTTCATC CGACGCAGCCGAGCAG 55℃

AAAGGCTGGCACTGGA CTAAACTCGCCTATGATGGAA 55℃

CAGCTCGATAAAGGGAGACG GCTGCATTAGCATCGTGTGT 55℃

CCCTGGAGAACAGAGTGGTC CTTGGACTTGGCTCTGACCT 55℃

AGCTGTGTTTCCCTTGTGAGA ACCTGGAAACTCACCTGCAA 55℃

(3)将步骤(2)获得的PCR扩增产物用8.0％的非变性聚丙烯酰胺凝胶进行电泳检测、银染法染色后，拍照；

(4)将步骤(3)的电泳检测结果，进行数字化处理，用遗传分析软件进行分析，获得每个个体之间的遗传距离，进行聚类分析，根据个体间的遗传距离聚类结果，进行亲子鉴定；所述步骤(2)中，在进行PCR扩增时，PCR反应总体积为10μL，其中含10×反应缓冲液1.0μL，Mg2+2mmol/L，dNTP 200μmol/L,上下游引物各0.2μmol/L，Taq酶0.3U，DNA 50ng～80ng，用灭菌双蒸馏水补足体积；

步骤(2)中，PCR反应条件为：94℃ 3min；94℃ 20s，退火20s，72℃ 20s，25～30个循环；72℃延伸5min；

步骤(4)中，使用的遗传分析软件为populations软件和MEGA3.1软件。