[发明专利]抗金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C的抗体及其应用

说明书

本发明公开了抗金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C的抗体及其应用，所述抗金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C的抗体识别的表位肽至少包括MntC_126‑128aa，氨基酸序列为LDN；该抗体通过培养表达载体的宿主细胞来生成单克隆抗体，生成的单克隆抗体被分泌到上清液中，通过层析技术将其纯化。本发明的抗体可以治疗由MRSA感染引起的脓毒血症，在预防和治疗金黄色葡萄球菌感染方面有重要意义。

技术领域

本发明涉及医学及免疫学领域，具体涉及抗金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C的抗体，还涉及抗金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C的抗体的应用。

背景技术

金黄色葡萄球菌(简称金葡菌)，为革兰阳性菌，是一种流行广泛、造成医院、社区相关感染的主要人类病原菌，可引起人类的多种疾病。感染以急性和化脓性为主。全身感染可导致骨髓炎、脓毒性关节炎、心内膜炎、肺炎、脓毒血症等严重感染及并发症，病死率可达20％。长期抗生素滥用使得细菌耐药问题日益加剧和突出。1961年耐甲氧西林金黄色葡萄球菌(methicillin-resistant Staphylococcus aureus,MRSA)被首次发现，被称作“超级细菌”一直以来呈多重耐药性发展，目前MRSA已成为ICU病房、术后感染、烧伤等感染率最高的革兰阳性菌，已成为临床上治疗的难题，严重威胁人类健康。随着2002年耐万古霉素金黄色葡萄球菌(vancomycin-resistant staphylococcus aureus,VRSA)的相继出现，万古霉素治疗MRSA的最后一道防线已被突破，目前临床上的感染面临“无药可救”的严峻形势。因此，寻找抗MRSA药物成为近年来治疗MRSA研究领域的重要方向。

金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C(MntC)是一种高度保守的细胞表面蛋白，也是金葡菌全身感染的重要毒力因子，通过促进从宿主环境中获取锰离子在金黄色葡萄球菌感染中其重要作用。锰离子转运蛋白活性的丧失或降低会使金黄色葡萄球菌对氧化应激敏感，从而使细菌容易受到免疫细胞的攻击而死亡，同时MntC具有黏附素活性，可能是金黄色葡萄球菌发病机理的一个特征。近年来，金黄色葡萄球菌疫苗经历了荚膜多糖疫苗、DNA疫苗和灭活疫苗几大阶段，但都未取得成功，基于抗体药物的被动免疫治疗MRSA感染，一方面它可以在第一时间迅速给感染者建立起特异的免疫保护，快速高效清除病原体，另一方面，它还可以帮助那些免疫力低下甚至免疫缺陷的MRSA易感人群获得即时、有效的免疫保护。

因此本发明基于上述背景，有必要开发一种抗金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C的抗体。

发明内容

有鉴于此，本发明的目的之一在于提供一种抗金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C的抗体；本发明的目的之二在于提供编码所述抗体的核苷酸序列；本发明的目的之三在于提供抗体在制备特异性结合金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C的试剂中的应用；本发明的目的之四在于提供所述抗体在制备治疗或预防金黄色葡萄球菌感染的药物中的应用。

为达到上述目的，本发明提供如下技术方案：

1、抗金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C的抗体，所述抗金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C的抗体识别的表位肽至少包括MntC_126-128aa，氨基酸序列为LDN。

优选的，所述抗金黄色葡萄球菌锰离子结合蛋白C的抗体识别的表位肽的氨基酸序列如SEQ ID NO.12～SEQ ID NO.15所示。

优选的，所述抗体包括重链和轻链，所述重链的可变区CDR1、CDR2、CDR3的氨基酸序列如SEQ ID NO.5、SEQ ID NO.6、SEQ ID NO.7所示或具有同等功能的CDR变体组成；所述轻链的可变区CDR1、CDR2、CDR3氨基酸序列如SEQ ID NO.9、SEQ ID NO.10和SEQ ID NO.11所示或具有同等功能的CDR变体组成。

重链的CDR区的位置如下：

VH外显子内的CDR1区氨基酸26至33；