[发明专利]一种有效微生物与白腐菌相结合生物处理玉米秸秆的方法

权利要求书

1.一种有效微生物与白腐菌相结合生物处理玉米秸秆的方法，该方法提供两种白腐菌：Pleurotus ostreatusTJPU06和Ceriporiopsis subvermisporaTJPU07，此方法的特征在于，按如下步骤进行：

(1)白腐菌菌丝体的制备

用灭菌解剖刀从两个PDA固体平板上分别切取4个0.5平方厘米的菌丝盘，无菌转入装有100mL PDA液体培养基的250mL锥形瓶中，在培养箱中30℃静置培养约1周，每隔2d轻摇一次。取每株白腐菌重悬1g湿菌丝于50mL无菌水中，用组织捣碎机低速破碎10s，得到均匀的菌丝悬浮液；

(2)玉米秸秆的发酵

玉米秸秆的生物发酵在50mL的锥形瓶中进行，瓶中含有2g灭菌或未灭菌的80目干玉米秸秆，所有样品在培养箱中30℃静置培养20d，以评估秸秆生物降解效果；

(3)玉米秸秆质量总损失的测定

将30mL无菌水加入锥形瓶中，轻摇20s，将锥形瓶放在平稳的桌子上5min使秸秆沉淀在锥形瓶底部，丢弃上清液中含有的菌丝体和其他微生物，重复洗涤三次，将降解后的秸秆以3000rpm离心5min，将分离的秸秆在85℃下干燥48h；

(4)玉米秸秆中主要成分生物降解率的测定

采用改进的范式洗涤法，将对照组原始秸秆和生物发酵后的秸秆分别经中性洗涤试剂、酸性洗涤试剂和72％的硫酸处理，最后在马弗炉中以550℃灰化，干燥后测定秸秆中半纤维素、纤维素和木质素的含量，半纤维素、纤维素和木质素的实际损失量通过减去生物处理后的秸秆中半纤维素、纤维素和术质素的残留量计算。

2.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(1)中的白腐菌菌丝体在30℃静置培养约一周，且每隔2d轻摇一次。

3.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(2)中的玉米秸秆在培养箱中30℃静置培养20d。

4.根据权利要求1所述的方法，其特征在于，步骤(3)中降解后的秸秆以3000rpm离心5min达到分离的目的。