[发明专利]一种用于牙髓干细胞向成骨细胞诱导分化的培养基及其制备方法以及应用

权利要求书

1.一种用于牙髓干细胞向成骨细胞诱导分化的培养基，其特征在于，包括：

4～5.5g/L BSA、1.5mg/L还原型谷胱甘肽、0.08～0.12mmol/L β-巯基乙醇、0.08％～1.5％(V/V)SITE、0.8～1.2M/L β-甘油磷酸、15～25μM /L L-抗坏血酸、0.5～1.2mM/L地塞米松、余量为添加了氨基酸浓缩液的低糖型DMEM培养基；所述SITE由等浓度的Sibiricoside-A溶液以及四氢叶酸溶液按体积比1:1的比例混合形成。

2.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述Sibiricoside-A溶液以及四氢叶酸溶液的体积浓度为0.16％～3.00％。

3.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述低糖型DMEM培养基中的葡萄糖浓度为1g/L。

4.根据权利要求1所述的培养基，其特征在于，所述氨基酸浓缩液为每升低糖DMEM培养基中加入1.0～2.0mL的MEM氨基酸溶液和0.3～0.8mL的MEM非必需氨基酸溶液。

5.一种如权利要求1～4任意一项所述的培养基的制备方法，其特征在于，包括以下步骤：

将BSA、还原型谷胱甘肽、β-巯基乙醇、SITE、β-甘油磷酸、L-抗坏血酸、地塞米松与氨基酸浓缩液的低糖型DMEM培养基混合，得到用于牙髓干细胞向成骨细胞诱导分化的培养基。

6.根据权利要求5所述的制备方法，其特征在于，所述混合温度为25±5℃。

7.一种牙髓干细胞向成骨细胞诱导分化的方法，其特征在于，包括以下步骤：

将经过扩增培养的牙髓干细胞接种于权利要求1～3任意一项所述的用于牙髓干细胞向成骨细胞诱导分化的培养基中进行诱导培养。

8.根据权利要求7所述的方法，其特征在于，所述经过扩增培养的牙髓干细胞按照如下方法进行制备：

将牙髓组织剪碎后，依次进行消化、接种、纯化和传代，得到经过扩增培养的牙髓干细胞。