[发明专利]一种高纯度硫酸多粘菌素B1晶型及其制备方法

权利要求书

1.一种高纯度的多粘菌素B1的晶型，其特征在于，所述晶型使用Cu-Ka辐射，以2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱显示在2.9°±0.2°、3.1°±0.2°处具有特征峰，并且所述晶型熔点为219.5～226.1℃。

2.根据权利要求1所述的晶型，其特征在于，所述结晶以2θ角度表示的X-射线粉末衍射图谱如附图1所示。

3.一种权利要求1中所述的晶型的制备方法，包括以下步骤：

(1)DAC制备分离：用纯化水将多组分的多粘菌素B样品溶解，采用DAC制备分离，分段收集多粘菌素B1组分；

(2)脱盐：将步骤(1)收集的多粘菌素B1组分浓缩后，通过大孔树脂吸附，用有机溶剂水溶液解析，收集解析液；

(3)浓缩：将步骤(2)收集的解析液稀释至有机溶剂比例为10-30％，然后将解析液浓缩；

(4)结晶：向步骤(3)得到的浓缩液中滴加有机溶剂，或向有机溶剂中滴加浓缩液，析出晶体。

4.根据权利要求3所述方法，其特征在于，所述方法还包括，步骤(5)过滤、干燥：步骤(4)析出晶体后，抽滤出固体，然后用结晶用有机溶剂淋洗，真空干燥，得到高纯度的多粘菌素B1的晶型。

5.根据权利要求3～4任一项所述方法，其特征在于，步骤(1)采用DAC制备分离，固定相填料为Daiso的SP-100-8-ODS-P；流动选择20-90％的乙腈盐溶液，盐浓度为3～10‰的硫酸钠，磷酸调节流动相pH为2.0-3.5。

6.根据权利要求3～4任一项所述方法，其特征在于，步骤(2)所述大孔树脂选自HZ820、HZ818、XAD1600N、SP825、H20SS中的一种，所述有机溶剂选自甲醇、乙腈、丙酮、乙醇中的一种，有机溶液的浓度为30-70％，(v/v)。

7.根据权利要求3～4任一项所述方法，其特征在于，步骤(3)将解析收集液浓缩至50-150g/L。

8.根据权利要求3～4任一项所述方法，其特征在于，步骤(4)滴加过程中温度控制在20～50℃，滴加结束后将温度控制在-10～20℃结晶；所述有机溶剂选自乙腈、四氢呋喃、甲醇、乙醇、丁醇，丙酮、丁酮、丙醇、异丙醇中的一种或几种混合液。

9.根据权利要求5所述方法，其特征在于，步骤(1)用纯化水将多组分的多粘菌素B样品溶解成50-200g/L的水溶液，任选的采用超声助溶，溶解后经过0.45u的微孔滤膜过滤，再采用DAC制备分离；检测波长为215mn，分段收集后，合并液相纯度≥99％的多粘菌素B1的所有产品。

10.根据权利要求3～4任一项所述方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤(1)DAC制备分离：用纯化水将多组分的多粘菌素B样品溶解成50-200g/L的水溶液，任选的采用超声助溶，溶解后经过0.45u的微孔滤膜过滤后备用；固定相填料为Daiso的SP-100-8-ODS-P；流动选择20-90％的乙腈盐溶液，盐浓度为3～10‰的硫酸钠，磷酸调节流动相pH为2.0-3.5；检测波长为215mn，分段收集后，合并液相纯度≥99％的多粘菌素B1的所有产品；

(2)脱盐：将收集的多粘菌素B1组分纳滤浓缩后，加浓缩液体积(3～5)倍的纯化水将溶剂的比例稀释至5-10％范围内，以1-5BV/h上大孔树脂吸附，大孔树脂优选HZ820、HZ818、XAD1600N、SP825、H20SS其中的一种；以1-5BV/h用纯化水洗后，用pH4.0-6.0的有机溶剂水溶液解析3-5BV；有机溶剂优选甲醇、乙腈、丙酮、乙醇中的一种，有机溶液的浓度为30-70％，收集解析液；

(3)浓缩：将解析液稀释至有机溶剂比例为10-30％范围内，将解析收集液浓缩至50-150g/L；

(4)结晶：将浓缩液滴加入有机溶剂中，或是将有机溶剂滴加入浓缩液中，滴加过程中将温度控制在20～50℃，滴加结束后将温度控制在-10～20℃结晶5～15小时；所诉结晶溶剂选自乙腈、四氢呋喃、甲醇、乙醇、丁醇，丙酮、丁酮、丙醇、异丙醇中的一种或几种混合液；

(5)过滤、干燥：抽滤出固体，用结晶用溶剂淋洗产品，控制温度30-60℃真空干燥得到多粘菌素B1新晶型。