[发明专利]一种胚芽细胞脱分化培养基质及其制备方法

说明书

本发明公开了一种胚芽细胞脱分化培养基质，所述胚芽细胞脱分化培养基质的配方为：MS、改性琼脂6‑8g/L、葡萄糖20‑26g/L、2，4‑二氯苯氧乙酸0.5‑1.1mg/L、果糖0.5‑1.1mg/L、营养液0.2‑0.7mg/L、改性蒙脱土5‑15g/L，pH值为5.6‑5.8。本发明胚芽细胞脱分化培养基质在常规的基础上通过对琼脂进行改性，使琼脂被钼酸钠溶液改性后能够增强胞脱分化培养基质的营养基能，同时可提高基质的抗菌环境，营养液的添加使培养基质能够提供多种微量元素，从而提高胚芽细胞分化的程度，中草药发酵剂通过营养剂的形式添加，目的使植物在吸收营养时能够持续的处于灭菌的环境。

技术领域

本发明涉及胚芽细胞技术领域，具体涉及一种胚芽细胞脱分化培养基质及其制备方法。

背景技术

大豆是中国重要粮食作物之一，已有五千年栽培历史，古称菽，中国东北为主产区，是一种其种子含有丰富植物蛋白质的作物。大豆最常用来做各种豆制品、榨取豆油、酿造酱油和提取蛋白质。豆渣或磨成粗粉的大豆也常用于禽畜饲料。豆通称黄豆。豆科大豆属一年生草本，高30-90厘米。大豆荚果肥大，稍弯，下垂，黄绿色，密被褐黄色长毛；种子2-5颗，椭圆形、近球形，种皮光滑，有淡绿、黄、褐和黑色等多样。花期6-7月，果期7-9月。

大豆胚芽细胞在脱分化过程中需要用到培养基质，现有的培养基质在胚芽细胞脱分化过程中虽可提供营养物质，但不具备抗菌、灭菌能力，容易影响到的胚芽细胞的脱分化效果。

发明内容

本发明的目的在于提供一种胚芽细胞脱分化培养基质及其制备方法，以解决上述背景技术中提出的问题。

为实现上述目的，本发明提供如下技术方案：

一种胚芽细胞脱分化培养基质，所述胚芽细胞脱分化培养基质的配方为：MS、改性琼脂6-8g/L、葡萄糖20-26g/L、2，4-二氯苯氧乙酸0.5-1.1mg/L、果糖0.5-1.1mg/L、营养液0.2-0.7mg/L、改性蒙脱土5-15g/L，pH值为5.6-5.8。

优选地，所述改性琼脂的制备方法为：将琼脂先采用紫外照射10-20min，然后再与钼酸钠溶液共混10-20min，共混转速为200-280r/min，共混结束，过滤，然后再干燥，即可。

优选地，所述紫外照射的功率为20-100W。

优选地，所述营养液包括以下重量份原料：硫酸镁1.2～1.3份、硫酸钠1.1～1.2份、硫酸锌0.8～1.0份、硫酸铜0.8～0.9份、中草药发酵剂0.2-0.5份。

优选地，所述营养液包括以下重量份原料：硫酸镁1.25份、硫酸钠1.15份、硫酸锌0.9份、硫酸铜0.85份、中草药发酵剂0.35份。

优选地，所述中草药发酵剂的制备方法为将金银花、艾草、蒲公英按照重量比3:2:1加入到煮沸锅中进行煮沸，得到汁液与酵母菌共同送入到发酵罐中进行发酵处理，发酵温度为28-32℃，发酵时间为1-2d，发酵结束，得到中草药发酵剂。

优选地，所述改性蒙脱土的制备方法为将蒙脱土先加入到去离子水中进尘超声分散，然后再干燥，再研磨1-3次，随后再热活化处理，得到改性蒙脱土。

优选地，所述热活化处理的具体步骤为：将蒙脱土以2-5℃/min的速率将温度升至150℃，保温10min，然后继续以1℃/min的速率将温度升至210℃，继续保温20-30min，保温结束，再自然恢复至室温，即可。

本发明还提供了一种制备胚芽细胞脱分化培养基质的方法，包括以下步骤：

步骤一，称取以上重量份原料：

步骤二，将MS、改性琼脂、葡萄糖、2，4-二氯苯氧乙酸、果糖、营养液依次加入到搅拌器中，启动搅拌器先搅拌10-20min，搅拌转速为700-1000r/min，得到基质A；