[发明专利]一种胚芽细胞脱分化培养基质及其制备方法

权利要求书

1.一种胚芽细胞脱分化培养基质，其特征在于，所述胚芽细胞脱分化培养基质的配方为：MS、改性琼脂6-8g/L、葡萄糖20-26g/L、2，4-二氯苯氧乙酸0.5-1.1mg/L、果糖0.5-1.1mg/L、营养液0.2-0.7mg/L、改性蒙脱土5-15g/L，pH值为5.6-5.8。

2.根据权利要求1所述的一种胚芽细胞脱分化培养基质，其特征在于，所述改性琼脂的制备方法为：将琼脂先采用紫外照射10-20min，然后再与钼酸钠溶液共混10-20min，共混转速为200-280r/min，共混结束，过滤，然后再干燥，即可。

3.根据权利要求2所述的一种胚芽细胞脱分化培养基质，其特征在于，所述紫外照射的功率为20-100W。

4.根据权利要求1所述的一种胚芽细胞脱分化培养基质，其特征在于，所述营养液包括以下重量份原料：硫酸镁1.2～1.3份、硫酸钠1.1～1.2份、硫酸锌0.8～1.0份、硫酸铜0.8～0.9份、中草药发酵剂0.2-0.5份。

5.根据权利要求4所述的一种胚芽细胞脱分化培养基质，其特征在于，所述营养液包括以下重量份原料：硫酸镁1.25份、硫酸钠1.15份、硫酸锌0.9份、硫酸铜0.85份、中草药发酵剂0.35份。

6.根据权利要求5所述的一种胚芽细胞脱分化培养基质，其特征在于，所述中草药发酵剂的制备方法为将金银花、艾草、蒲公英按照重量比3:2:1加入到煮沸锅中进行煮沸，得到汁液与酵母菌共同送入到发酵罐中进行发酵处理，发酵温度为28-32℃，发酵时间为1-2d，发酵结束，得到中草药发酵剂。

7.根据权利要求1所述的一种胚芽细胞脱分化培养基质，其特征在于，所述改性蒙脱土的制备方法为将蒙脱土先加入到去离子水中进尘超声分散，然后再干燥，再研磨1-3次，随后再热活化处理，得到改性蒙脱土。

8.根据权利要求7所述的一种胚芽细胞脱分化培养基质，其特征在于，所述热活化处理的具体步骤为：将蒙脱土以2-5℃/min的速率将温度升至150℃，保温10min，然后继续以1℃/min的速率将温度升至210℃，继续保温20-30min，保温结束，再自然恢复至室温，即可。

9.一种制备如权利要求1-8任一项所述的胚芽细胞脱分化培养基质的方法，其特征在于，包括以下步骤：

步骤一，称取以上重量份原料：

步骤二，将MS、改性琼脂、葡萄糖、2，4-二氯苯氧乙酸、果糖、营养液依次加入到搅拌器中，启动搅拌器先搅拌10-20min，搅拌转速为700-1000r/min，得到基质A；

步骤三，向基质A中加入营养液、改性蒙脱土，继续以100-200r/min的低转速进行搅拌2-5h，搅拌温度为35-45℃，搅拌结束，得到胚芽细胞脱分化培养基质。