[发明专利]一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法

说明书

本发明属于转基因大豆生态安全评估领域，具体涉及一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法，统计相同生长环境条件下转基因大豆为父本与野生大豆杂交所结荚的饱粒种子数和野生大豆自交所结荚的饱粒种子数的饱粒比，评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性。具体试验操作步骤包括花期相遇的种植技术、彻底去雄技术、成功授粉技术、自交花蕾定蕾技术、数据统计方法、亲和性评价技术。本发明提出了转基因大豆与野生大豆杂交亲和性评价试验实施的技术和评价标准，对转基因大豆安全地投入生产时的环境风险管理及预防具有重要作用。本发明具有试验操作性强、数据处理简单、结果客观、准确性高等优点。

技术领域

本发明涉及一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法，属于转基因大豆生态安全评估领域。

背景技术

1996年转基因作物开始商业化种植。至2018年，转基因作物的种植面积增至1.917亿公顷。在所有转基因作物中转基因大豆(Glycine max)的种植面积最大，2018年达到0.959亿公顷，占全球转基因作物种植面积的50％，而种植的所有转基因大豆中都含有抗除草剂基因。近年来，中国大豆进口量持续增长，到2017年已达9553万吨。中国是野生大豆资源主要分布区，为了防止外源基因污染野生大豆资源，在商业化生产之前对转基因大豆可能带来的基因漂移风险进行系统性评估刻不容缓。

野生大豆(Glycine soja Sieb.et Zucc.)和大豆染色体数相同2n＝40，同属G染色体组，是大豆直接的祖先，是其遗传资源的重要组成部分，在大豆起源与进化的研究中具有重要的价值。调查发现，中国除海南省外其余大豆种植区均有野生大豆的分布，且随着大豆种植面积的增加，栽培大豆种植区域与野生大豆分布区域的重叠面积也逐步增加。大豆与野生大豆之间没有生殖隔离，极容易杂交，目前已有相关研究表明栽培大豆与野生大豆在自然环境中发生了基因互渗。花粉介导的基因漂移是基因漂移的主要途径，基因漂移的可能性受转基因作物和近缘种的亲和性、花期重叠程度、分布重叠程度、环境(如风力、风向)条件等以及携带抗性基因后代的适合度的影响。由遗传背景决定的亲和性是决定性因素。在中国不同地区野生大豆资源具有一定的遗传差异，且在长期适应不同生长环境的过程中发生了丰富的遗传分化。由于转基因大豆和遗传背景不同的野生大豆的亲和性存在差异，在花期重叠的情况下，在不同产区种植转基因大豆的风险不同；同时由于这种遗传背景的不同，不同野生大豆种群在自然条件下的结荚率和结实率也存在显著性差异，单用结荚率和结实率来评价亲和性并不科学。因此提供一种科学精确的转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的评价方法，不仅能为不同种群的野生大豆与转基因大豆亲和性实验提供科学的参考标准，更能为评估转基因大豆向野生大豆基因漂移的生态风险研究提供理论基础。

发明内容

针对现有技术存在的问题，本发明提供一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法。

本项发明的技术方案是：

一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法，所述方法包括：统计相同生长环境条件下转基因大豆为父本与野生大豆杂交所结荚的饱粒种子数和野生大豆自交所结荚的饱粒种子数，并将杂交和自交所结荚的饱粒种子数比值作为饱粒比来评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性。

根据权利要求1所述的一种评价转基因大豆与野生大豆杂交亲和性的方法，其特征在于，所述方法包括：

花期相遇种植技术：在充分了解转基因大豆与野生大豆生长特点的基础上，对转基因大豆与野生大豆分批种植，使二者的花期相遇；

彻底去雄技术：等到野生大豆与转基因大豆花期相遇时，选择野生大豆植株中上部未发生自交且柱头已经成熟的花蕾，用镊子去掉花萼，捏住整个花冠中部，斜向旗瓣方向轻轻用力，将整个花冠连同花药一同去除，然后取周围新鲜的叶片，包裹在花蕾外围，以保护裸露的柱头；