[发明专利]源于广西巴马具有高产维生素B能力的植物乳杆菌Bama06及其用途

说明书

源于广西巴马具有高产维生素B能力的植物乳杆菌Bama06及其用途，从广西巴马长寿老人肠道中分离得到的乳酸菌，测定不同乳酸菌在37℃下于MRS/M17培养基、牛乳培养基及豆浆培养基中发酵50 h发酵液的pH和活菌数，得到可以在不同培养基中生长产酸的乳酸菌，同时利用高效液相色谱法测定发酵液中维生素B的种类与产量，筛选出具有高产维生素B能力和较高产酸能力及活力的乳酸菌；经API试剂条及16s rDNA测序分析将筛选出的菌株Bama06鉴定为植物乳杆菌。本发明菌株的耐酸耐胆盐能力较强，可应用于制作富含维生素B的功能食品，利用本发明菌制得的产品，具有富含维生素B的特点。

技术领域

本发明涉及生物技术领域，特别涉及源于广西巴马具有高产维生素B能力的植物乳杆菌Bama06及其用途。

技术背景

维生素B是机体必须的微量营养素之一，具有多种生理功能，常以辅酶的形式参与调节各种代谢反应，对人体健康十分重要。维生素B在人体含量很少，大部分不能由人体自身产生，很多人由于膳食营养不平衡、吸收效率低而导致维生素B缺乏进而引起疾病，须通过外源性的维生素B营养食品或者药物来补充。因此，开发科学、健康的维生素膳食补充产品成为食品行业关注的焦点。

乳酸菌作为公认的安全微生物，具有合成维生素B的能力。生物合成的维生素B具有安全性、经济性及环境友好性等优点，因此，使乳酸菌发酵食品成为人们日常维生素B营养强化的补充剂可进一步为人类健康事业添砖加瓦。

发明内容

本发明第一个目的在于提供一种具有高产维生素B能力和较高产酸能力及活力的乳酸菌，以期进一步开发利用。

源于广西巴马具有高产维生素B能力的植物乳杆菌（Lactobacillus plantarum）Bama06，于2019年10月16日保藏于中国微生物菌种保藏管理委员会普通微生物中心，地址：北京市朝阳区北辰西路1号院3号，中国科学院微生物研究所，保藏编号为CGMCC NO.18694。

经实验验证，本发明菌株在同一批次广西巴马长寿老人肠道中分离的63株乳酸菌中产维生素B的种类与产量最高，表明本发明菌株具有良好的产维生素B的能力。经测定发现在MRS、牛乳及豆浆基质中37℃发酵50 h后，发酵液pH值分别为3.99、4.74和3.99，且活菌数均大于10⁹ CFU/mL，有较高的产酸能力及活力，经37℃发酵50 h，在MRS发酵液中维生素B₁、维生素B₅及叶酸分别超过2.0 mg/L、41.5mg/L及0.5mg/L；在牛乳发酵液中维生素B₂、维生素B₃和维生素B₅分别大于8.4mg/L、5.0mg/L和11.9mg/L；在豆浆发酵液中维生素B₃的生物合成量大于1.0 mg/L。

通过API试剂条及16S rDNA序列比对分析将该菌株鉴定为植物乳杆菌。本发明菌株经耐酸耐胆盐实验发现，该菌株在pH为3.0的人工胃液中存活率为98.67%，在胆盐浓度为0.10%、0.30%、0.50%的MRS培养基中培养3h存活率分别大于71.9%、43.3%及11.2%。

本发明的第二个目的是提供高产维生素B和较高产酸能力及活力的植物乳杆菌Bama06的制备方法，即采用传统涂布平板分离法从广西巴马长寿村采集的样品中分离乳酸菌。

本发明的第三个目的是提供高产维生素B能力和较高产酸能力及活力乳酸菌的用途。

本发明菌株在牛乳基质中表现出良好的维生素B合成能力，可以利用其研发富含维生素B的发酵乳产品或乳酸菌饮料。

也可将该乳酸菌的培养物经冷冻干燥用于生产含有维生素B的膳食功能补充剂。

由于生物合成的维生素B更适合人体吸收，更安全，该乳酸菌发酵物可以用作一种食疗性产品。