[发明专利]一种基于循环肿瘤细胞正向分离系统的分离方法

权利要求书

1.一种基于循环肿瘤细胞正向分离系统的分离方法，该分离系统包括：微流控芯片(1)、给液模块(2)、磁场产生模块(3)、收集模块(4)、通道和控制器；

所述通道包括：用于连接所述微流控芯片(1)的过滤洗脱膜块(1-1)、气栓去除模块(1-2)、结合模块(1-3)、富集模块(1-4)和所述收集模块(4)中CTCs富集样本收集器(4-1)的主通道；

用于向过滤洗脱膜块(1-1)供给介质的介质支通道；

用于向结合模块(1-3)供给免疫磁性粒子的设有开关部件(14)的免疫磁性粒子支通道；

用于收集所述过滤洗脱模块滤液的设有开关部件(16)的前废液收集支通道；

和用于收集所述富集模块(1-4)滤液的设有开关部件(17)的后废液收集支通道；

所述介质支通道包括：

两端分别位于所述过滤洗脱膜块(1-1)横向和纵向且在其横向上设有左开关部件(11)和右开关部件(12)的共用通道；

一端与洗液给液器(2-2)连接，另一端与所述左(11)和右(12)开关部件间的共用通道连接的洗液支通道；

一端与所述血液样本给液器(2-1)连接，另一端连接于所述右开关部件(12)外侧且与所述共用通道纵向连接的且设有开关部件(13)的血液样本支通道；

其特征在于，所述方法包括：

步骤1.对血液样本的过滤；

步骤2.经所述步骤1过滤的CTCs与免疫磁性粒子的孵育和结合，用于特异性磁性标记CTCs；

步骤3.对免疫磁性粒子标记的CTCs的提纯。

2.如权利要求1所述的一种基于循环肿瘤细胞正向分离系统的分离方法，其特征在于，步骤1包括：

步骤1-1.将所述过滤洗脱模块(1-1)置于夹持装置(5)的过滤夹持结构中，在所述控制器的控制下，打开所述开关部件(13)和所述前废液收集支通道上的开关部件(16)实现对血液样本的过滤；

步骤1-2.在给液控制器(2-4)的控制下，关闭所述开关部件(13)；

步骤1-3.打开所述右开关部件(12)，使洗液流经过滤洗脱膜块(1-1)直至滤膜上血液颜色消失，滤液经前废液收集通道进入废液收集器(4-2)，自动化臂将过滤洗脱模块(1-1)的夹持装置(5)的过滤夹持件更换为冲洗夹持装置后，再压力封合；

步骤1-4.所述磁场控制器(3-3)控制所述结合模块(1-3)磁场和富集模块(1-4)磁场，使所述结合模块(1-3)磁场为均匀分布的磁场，并使所述富集模块(1-4)底部一侧的磁场为间歇式强磁场；

步骤1-5.在给液控制器(2-4)的控制下，关闭所述右开关部件(12)，开启所述开关部件(14)，以低于1mL/min流速给所述结合模块(1-3)供给免疫磁性粒子，免疫磁性粒子停留在结合模块(1-3)；

步骤1-6.关闭所述开关部件(14)和所述开关部件(16)。

3.如权利要求2所述的一种基于循环肿瘤细胞正向分离系统的分离方法，其特征在于，所述步骤1中，

所述过滤和冲洗均以液体自身的驱动力为动力，该步骤中的介质的流速在15mL/min以内。

4.如权利要求1所述的一种基于循环肿瘤细胞正向分离系统的分离方法，其特征在于，

打开所述开关部件(11)和(17)，用洗液冲洗滤膜，将截留于所述过滤洗脱模块(1-1)滤膜上的CTCs释放出来；

在所述结合模块磁铁(3-1)作用下，使流入结合模块(1-3)的CTCs与结合模块(1-3)内静止的免疫磁性粒子特异性孵育结合，形成CTCs-免疫磁性粒子的复合结构。

撤除结合模块磁铁(3-1)，其中的CTCs-免疫磁性粒子的复合结构在流体力和富集模块(1-4)磁场作用下停留于该富集模块(1-4)，废液进入收集器(4-2)；

关闭所述开关部件(11)和所述开关部件(17)，撤除富集模块(1-4)的磁场；

打开所述开关部件(11)和所述开关部件(15)，使所述CTCs-免疫磁性粒子的复合结构进入CTCs富集样本收集器(4-1)；

关闭所述开关部件(11)和所述开关部件(15)；

在所述收集控制器(4-3)控制下开启或关闭开关部件(15)、(16)和(17)。