[发明专利]鉴别冬虫夏草的PCR试剂盒及PCR方法在审
| 申请号： | 201911043013.6 | 申请日： | 2019-10-29 |
| 公开（公告）号： | CN112725473A | 公开（公告）日： | 2021-04-30 |
| 发明（设计）人： | 段庆梓;梁恒兴;王巍;戴琪;张彪;尚柯;张玉 | 申请（专利权）人： | 成都市食品药品检验研究院 |
| 主分类号： | C12Q1/689 | 分类号： | C12Q1/689;C12Q1/686;C12Q1/04;C12N15/11 |
| 代理公司： | 成都高远知识产权代理事务所(普通合伙) 51222 | 代理人： | 李高峡;张娟 |
| 地址： | 610000 四*** | 国省代码： | 四川;51 |
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| 摘要： | |||
| 搜索关键词： | 鉴别 冬虫夏草 pcr 试剂盒 方法 | ||
【权利要求书】：
1.一对鉴别冬虫夏草真伪的PCR引物，其特征在于，其序列如SEQ ID NO.1-2所示。
2.一种鉴别冬虫夏草真伪的PCR试剂盒，其特征在于，它包括如权利要求1所示的引物。
3.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，它还包括Taq DNA聚合酶、PCR缓冲液和dNTP。
4.如权利要求2所述的试剂盒，其特征在于，它还包括冬虫夏草DNA阳性对照品。
5.一种鉴别冬虫夏草真伪的PCR方法，其特征在于，包括如下步骤：
1)提取待测样品的DNA；
2)以所得DNA为模板进行PCR反应；
3)电泳检测PCR产物；
步骤2)中使用序列如SEQ ID NO.1-2所示的引物；
若步骤3)检测到介于100-200bp条带，或者检测到与冬虫夏草DNA阳性对照品扩增条带大小一致的条带，即可判断冬虫夏草为真品，否则判断为伪品。
6.如权利要求5所述的PCR方法，其特征在于，步骤2)的反应的退火温度是50～58℃，优选为58℃。
7.如权利要求6所述的PCR方法，其特征在于，步骤2)的反应程序是：
a.95℃预变性3分钟；
b.95℃30秒，58℃30秒，72℃30秒，循环反应25-35次；
c.72℃延伸5分钟。
8.如权利要求7所述的PCR方法，其特征在于，步骤2)的子步骤b中，循环反应次数为30次。
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